【摘 要】
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该文选取钙调蛋白作为研究对象,系统地比较了不同浓度的钙离于和稀土离子对它的靶酶钙调神经磷酸酶,磷脂酶A、乳酸脱氢酶活性的影响,并采用荧光光谱、同步荧光光谱、紫外差谱
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该文选取钙调蛋白作为研究对象,系统地比较了不同浓度的钙离于和稀土离子对它的靶酶钙调神经磷酸酶,磷脂酶A<,2>、乳酸脱氢酶活性的影响,并采用荧光光谱、同步荧光光谱、紫外差谱、红外光谱等方法研究了它们对钙调蛋白及其靶酶构象变化的影响.发现稀土离子对钙调蛋白靶酶的活性均表现出"低浓度促进,高浓度抑制"的Hormesis效应,由于靶酶分子结构的差异,其最大激活浓度有所区别,钙调蛋白可以缓解稀土离子对靶酶的抑制作用;发现高浓度的稀土离子与钙调蛋白作用后,可以降低钙调蛋白与靶肽/酶分子的亲合性,并抑制其调节靶酶活性功能的发挥;稀土离子与钙调蛋白作用后,增大其α-螺旋含量,减少β-折叠结构,对小肽的二级结构影响较小;二乙三氨五乙酸及其衍生物二乙三胺五乙酸-双二甲酰胺和二乙三胺五乙酸-双(异烟肼)可以作为乳酸脱氢酶的竞争性抑制剂抑制其活性,抑制常数分别为3.37、7.41、8.52μmol/L,钙调蛋白也可以缓解它们对脱氢酶的抑制作用;首次制备出一株由稀土离子诱导钙调蛋白构象变化后的单克隆抗体2C3,该抗体可以特异性地识别含稀土的钙调蛋白,与Ca-CaM、La-CaM、Eu-CaM以及Yb-CaM之间的解离常数分别为157、26.8、21.8和64.8 nmol/L,该抗体还能够区分钙调蛋白结合不同浓度稀土离子后的构象状态.
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