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目的：制备含大鼠脑源性神经营养因子基因(Brain-derived NeurotrophicFactors，BDNF)的重组逆转录病毒pLXSN-BDNF，进行体外包装以获得稳定的产毒细胞系，并检测病毒的表达情况，为今后探讨神经营养因子在视神经损伤修复中的应用奠定基础。
方法：利用RT-PCR的方法从大鼠海马组织的总RNA中扩增：BDNF基因片段，用体外连接的方法将BDNF基因和逆转录病毒pLXSN的酶切产物连接成重组病毒pLXSN-BDNF。利用脂质体转染法将重组逆转录病毒pLXSN-BDNF导入PA317细胞系中完成体外包装，得到稳定的产BDNF的细胞株，以获取高滴度的分泌BDNF的病毒上清，并将获得的重组逆转录病毒感染NIH3T3细胞，观察BDNF在NIH3T3细胞中的表达情况。
结果：经 PCR、酶切和测序鉴定，利用脂质体转染法获得重组逆转录病毒pLXSN-BDNF已成功导入PA317细胞中，所获得的包装细胞PA317可以分泌重组的逆转录病毒，并可在NIH3T3细胞中表达。
结论：本研究成功制备了重组逆转录病毒pLXSN-BDNF，通过对病毒的包装，获得了稳定的产毒细胞株，并在NIH3T3细胞中成功表达，为今后感染神经干细胞，探索以神经干细胞作为基因工程细胞，促进神经元进行再生和修复，进一步研究BDNF基因治疗视神经损伤疾病奠定基础。