论文部分内容阅读
目的：双酚A（Bisphenol A, BPA）是一种典型的环境内分泌干扰物，主要应用于食品包装行业和牙科，如用于生产聚碳酸酯和无数塑料制品，包括光盘，食品内衬，热（传真）纸，安全帽，粘合剂，粉末涂料等。它的广泛使用，对环境造成了严重的污染，对人类的健康也造成了极大的威胁。已有研究显示，在青春发育期，对SD雄性幼鼠进行BPA的亚急性暴露，可造成大鼠的肾脏损害，并可导致肾积水。但是围产期ＢＰＡ暴露是否可导致子代大鼠肾脏的损害还不清楚。本研究采用了围产期ＢＰＡ暴露的大鼠动物试验模型，研究ＢＰＡ对子代大鼠肾脏损害的影响。方法：在整个妊娠期和泌乳期，怀孕的Wistar母鼠采用随机的方法分为三组：对照组（玉米油）、低剂量组（50μg/kg/day BPA）、高剂量组（250μg/kg/day BPA）。三组大鼠分别接受各组别剂量的灌胃染毒，直至断乳后，子代接受常规饮食至15周。监测子代的体重以及其他生理指标的变化。于第15周时收集尿液、断头处死各组仔鼠，收集肾脏等主要脏器。用生化分析仪、ＨＥ染色、Masson染色、实时定量PCR、免疫印迹、免疫组织分析等技术分别检测尿肌酐（creatinine，CR）、尿素氮(ureanitrogen, BUN)、尿蛋白（Urine protein, UPE）等生化指标、肾脏的病理学改变、肾积水纤维化相关分子TGF-β1、Smad2、VEGF、EGF、ET-1、CD40、CD3、Ⅳ型胶原蛋白等的mRNA的表达水平及蛋白水平的改变。结果：哺乳期间，BPA暴露组子代体重与对照组相比，变化没有差异。断乳后，至第15周处死时，子代雌性大鼠的体重和肾重及肾脏系数与对照相比，差别未有统计学意义，而子代各剂量组雄鼠与对照组相比，体重增加，有统计学差异。第15周龄各剂量组子代雄鼠的肾重及肾脏系数与对照组相比，有减小趋势，但未有统计学差异。各剂量组雌性大鼠的UPE、BUN、CR差异均无统计学意义，而雄性大鼠的UPE和CR与对照组相比显著升高。而BUN与对照组比较无统计学差异。各组雄性大鼠的肾脏切片呈现一定的病理变化，包括肾实质变薄，肾间质增宽，肾小管扩张、肾小囊扩张，部分肾小球结构破坏，失去正常形态，伴细胞浸润。各剂量组雄性子代大鼠肾脏纤维化相关分子TGF-β1及其下游调控分子Smad2的ｍRNA表达增强，VEGF的ｍRNA表达显著减弱。同时，免疫印迹结果也显示，TGF-β1、Smad2、VEGF的蛋白表达量也有相应的变化趋势。各剂量组EGF的ｍRNA表达量下降，但未有统计学差异。低剂量组ET-1ｍRNA表达量显著升高，有统计学意义。免疫组化的结果显示，剂量组肾间质CD3+T淋巴细胞较对照组增多，低剂量组肾小管上皮细胞CD40的表达也显著增强。各剂量组IV型胶原在肾小管上皮细胞胞浆和基底膜呈阳性表达。结论：围产期（50μg/kg/day、250μg/kg/day）BPA暴露可影响成年子代雄性大鼠的肾脏功能，其肾脏出现积水和纤维化样改变。围产期BPA暴露对子代雄性大鼠肾脏的影响存在剂量效应关系。