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禽流感是目前影响世界养禽业的最严重疫病之一，不仅给养禽业造成了很大的危害，而且也能感染人并致死亡，严重危害了人们的身体健康，给人类的健康带来了严重威胁。针对禽流感流行的这种严峻状况，迫切需要建立一种快速诊断高致病性禽流感和人禽流感的方法，研制一种能预防高致病性禽流感和人禽流感的亚单位疫苗，从而有效的预防和控制禽流感，保障人们的身体健康，促进畜牧业的快速发展。
血凝素蛋白(HA)是禽流感病毒最重要的结构蛋白，占囊膜蛋白的90％，是诱导体液免疫的主要靶抗原，可刺激机体产生中和抗体，抵抗感染和疾病发生，因此对AIV的诊断、防制的研究多集中于对HA蛋白的研究。
本研究利用RT-PCR技术扩增了A/Duck/BJ/W2/04(H5N2)亚型禽流感病毒的HA基因的cDNA，将其克隆到pGEM-T中并测序，将测序结果与GenBank中发表的一些序列进行核苷酸和氨基酸比较，比较结果发现测序序列与A/Duck/Mongolia/54/01(H5N2)和A/Duck/Primorie/2633/01(H5N3)序列的同源性分别为99％和98％，并且在HA切割位点处没有多个碱性氨基酸的插入序列，证明其为弱毒株。
分别将重组质粒pGEM-HADNA与转移载体pFastBacHTADNA用BamHI和SalI双酶切处理，T4DNA连接酶连接，用连接产物转化大肠杆菌DH5a感受态细胞，得到重组转移载体pFastBacHT-HA质粒DNA。将重组转移载体转化含穿梭载体Bacmid的大肠杆菌DH10Bac感受态细胞，于选择性平板上37℃培养，挑取发生转座作用生成的白色菌落，于选择性培养基中扩大培养，碱裂解法小量提取重组BacmidDNA，并做PCR分析鉴定，命名为rBacmid-HADNA。将纯化的rBacmid-HADNA转染昆虫细胞sf9，收集病毒的P1Stock及转染细胞，进行重组病毒的PCR鉴定及蛋白表达的SDS-PAGE鉴定。PCR鉴定结果显示从收集的病毒液中扩增出了特异的HA基因片段，大小与预期值相符，从而说明rBacmid-HADNA成功转染到sf9细胞里，并在其中增殖。经过SDS-PAGE、Westernblot和IFA检测，结果表明HA基因在昆虫细胞中表达了大小约为66kD的重组蛋白。
采用琼脂凝胶免疫扩散试验检测表达蛋白的抗原性。结果表明，表达蛋白能与H5亚型阳性血清发生特异性结合，并且同H7、H9亚型AIV阳性血清没有交叉反应，说明表达蛋白具有很好的抗原性和特异性。
HA基因重组蛋白的成功表达，为以后以此蛋白作为免疫抗原制备单克隆抗体以及作为诊断抗原建立ELISA诊断试剂盒，研制预防禽和人禽流感亚单位疫苗奠定了基础。