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研究背景肾细胞癌(Renal cell carcinoma,RCC)是起源于肾小管上皮细胞的一种普遍的实体瘤。由于RCC对放化疗并不敏感,手术治疗仍是治疗RCC的唯一手段。因此,目前迫切需要寻找治疗RCC的新型策略。本研究的目的就是蝙蝠葛碱(一种双苄基异喹啉类生物碱)对RCC细胞的作用及其机制。研究方法我们用MTT实验检测蝙蝠葛碱对RCC细胞活力的影响,流式细胞仪检测细胞周期,ELISA实验检测细胞凋亡,western blot实验检测蛋白表达情况。研究结果我们的研究发现蝙蝠葛碱可以有效抑制RCC细胞786-O、Caki-1、A-498和ACHN的活性。另外,蝙蝠葛碱诱导RCC细胞阻滞在G0/G1期。我们还发现蝙蝠葛碱处理RCC细胞后caspase-9和caspase-3表达改变,但是caspase-8活性表达没有变化,因此我们认为蝙蝠葛碱通过线粒体途径诱导RCC细胞凋亡。更重要的是,我们的研究结果表明蝙蝠葛碱的这一系列生物学作用都是通过抑制PI3K/Akt信号通路发挥作用。研究结论因此,我们认为蝙蝠葛碱通过PI3K/Akt信号通路抑制肾细胞癌细胞活力、诱导细胞G0/G1期阻滞和凋亡,蝙蝠葛碱对肾细胞癌的抑制作用为其成为潜在的治疗药物提供的了理论依据。背景Micro RNAs(mi RNAs)已经被发现参与肿瘤的发生发展。有报道表明Mi R-205-5p在多种人肿瘤中失调。然而,对mi R-205-5p在人肾细胞癌(Renal Cell Carcinoma,RCC)中的作用还不清楚。我们当前研究的目的就是调查mi R-205-5p在RCC中的角色。方法RT-PCR检测RCC组织和细胞中mi R-205-5p表达情况;CCK-8实验检测mi R-205-5p对细胞增殖的影响;划痕实验调查对细胞迁移的影响;核小体ELISA实验评估mi R-205-5p对细胞凋亡的作用;Western blot实验检测蛋白表达的改变;我们还使用了生物信息学分析和荧光素酶报告基因实验分析了mi R-205-5p存在的潜在的靶基因;最后,我们使用了裸鼠成瘤实验调查了mi R-205-5p在体内对肿瘤的影响。结果与癌旁组织相比,在25例RCC组织中mi R-205-5p表达被下调,在RCC细胞中mi R-205-5p表达同样下调,而且mi R-205-5p表达减少与不佳的临床效果相关。通过体外实验发现,在RCC细胞内过表达mi R-205-5p后可以显著性抑制RCC细胞的增殖、迁移和侵袭。更进一步,生物信息学分析和荧光素酶报告基因实验发现mi R-205-5p直接靶向PI3K/Akt信号通路中重要的成分血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)基因的3’-UTR端,而且我们发现mi R-205-5p负调控VEGFA的表达,在透明肾细胞癌组织(Clear Cell Renal Cell Carcinoma,cc RCC)中,mi R-205-5p与VEGFA表达呈负相关,最后,体内实验我们发现mi R-205-5p过表达能抑制RCC的生长。结论总之,我们认为在RCC中mi R-205-5p通过PI3K/Akt信号通路,尤其是VEGFA表达抑制RCC细胞的增殖和迁移、促进凋亡,为寻找治疗RCC提供了潜在的治疗靶点。