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本研究从2004年华南地区患病的鸡、鸭中分离到的3株鸡源和1株鸭源H5N1亚型禽流感病毒，经血凝试验(HA)和琼脂扩散试验(AGP)并通过透射电镜观察，初步鉴定为禽流感病毒。通过血凝抑制试验(HI)和神经氨酸酶抑制试验(NI)进一步鉴定，证实为H5N1亚型禽流感病毒。分别命名为：A/Chicken/Gangdong/219/2004(H5N1)(以下简称为AIVZJ)，A/Duck/Gangdong/221/2004(H5N1)(以下简称为AIVFS)，A/Chicken/Gangdong/223/2004(H5N1)(以下简称为AIVGZ)，A/Chicken/Fujian/227/2004(H5N1)(以下简称为AIVFJ)。
结果表明：AIVZJ、FS、GZ、FJ对鸡胚的半数致死量(ELD50)分别为10-7.5/0.2mL，10-8.17/0.2mL，10-7.17/0.2mL，10-8.33/0.2mL；鸡胚平均死亡时间(MDT)分别为：72h、24h、21h、40h；对鸡的静脉接种致病指数(IVPI)分别为：2.94/0.1mL，1.93/0.1mL，2.97/0.1mL，3.0/0.1mL；1日龄雏鸡的脑内接种致病指数(ICPI)分别为：1.94/0.05mL，1.92/0.05mL，1.91/0.05mL，1.94/0.05mL；对鸡的半数致死量(CLD50)分别为10-6.71/0.2mL，10-5.42/0.2mL，10-5.5/0.2mL，10-6.5/0.2mL。
AIVZJ、FS、GZ、FJ对鸭的半数致死量(DLD50)分别为：10-1.5/0.1mL，10-2/0.1mL，10-1.33/0.1mL，10-1.37/0.1mL；致病性试验结果表明，AIVFS对鸭的致病性强于其它3株病毒。
对BALB/c鼠的MID50分别为10-2.5/0.05mL，10-3.5/0.05mL，10-2.5/0.05mL，10-2.5/0.05mL；对BALB/c鼠致病性试验结果显示，攻毒后小鼠出现体重减轻，皱毛，弓背和震颤翻滚等症状，4个毒株引起的小鼠症状相似。小鼠死亡时间集中在攻毒后9-11天，以AIVFS株为例，死亡小鼠的肺脏淋巴细胞浸润，淤血出血，肺脏细胞变性坏死。脑细胞空泡性变性较严重，出血，淤血。肝脏，脾脏，肾脏，心脏病变轻微。在攻毒后第14d，只有感染AIVFS病毒的小鼠血清抗体转阳。
猪的感染试验结果显示，AIVFS和AIVGZ病毒能感染猪，猪只表现出体温升高的轻微临床症状，第14d抗体转阳，对照组猪只一切正常。
AIVZJ、FS、GZ、FJ的组织细胞半数感染量(TCID50)分别为10-4.6/0.1mL，10-5.8/0.1mL，10-7.0/0.1mL，10-6.5/0.1mL。金刚烷胺耐药性试验表明，除AIVZJ病毒显示出一定的耐药性外，其它三株病毒都对金刚烷胺敏感。
病毒抗原性差异研究结果显示病毒之间的抗原相关系数均在0.67-1.5之间，表明4株病毒的抗原性无明显差异。
本研究还对4株病毒的HA，NA，M，NS，PB2进行了克隆测序，结果表明：4株病毒HA基因核苷酸只有一个开放阅读框(ORF)，相比较其它3株病毒，AIVZJ的HA基因核苷酸在1061位-1063位连续缺失了3个核苷酸，造成了1个氨基酸的缺失；AIVFJ病毒在HA1蛋白的154位多了一个糖基化位点。4株病毒的受体结合位点高度保守，仅AIVZJ在受体结合位点的口袋右缘发生点突变S129L。4株病毒HA裂解位点氨基酸序列符合高致病性禽流感病毒的分子特征。同源性和进化树分析表明4株病毒与欧亚谱系代表株Ire/113/83的亲缘关系较近。
与鸭源AIVFS病毒相比，其它3株鸡源病毒的NA基因编码的NA蛋白在颈部49-68位连续缺失了20个氨基酸，导致了3个糖基化位点的丢失。AIVFS的NA蛋白共有8个糖基化位点，其它病毒有3个。
AIVZJ、FS、GZ、FJ株的NS1蛋白在第80-84位缺失了5个氨基酸。相比较97香港人源禽流感病毒的NS1蛋白第92位氨基酸为由D突变为E，本研究的4株病毒相对保守。
AIVZJ株的M2蛋白的31位由S突变为N，导致该病毒对金刚烷胺产生一定的抗药性，其它3株病毒M2蛋白的耐药性位点没有发生突变。
4个毒株的PB2蛋白627位氨基酸均为E，701位均为D，高度保守。