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目的
观察外源性精胺(Sp)对大鼠胸主动脉环张力的影响,并初步探讨其可能机制;同时观察Sp对传代培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)相关指标的影响。
方法
(1)采用离体血管环灌流方法,观察不同浓度外源性精胺对正常孵育以及无Ca<2+>、去内皮、去甲肾上腺素(NA)或KCl(60mmol/L)预处理、存在维拉帕米(Vp)、加入咖啡因等条件下血管张力的影响。(2)采用传代培养的方法,分别观察不同浓度精胺(50μmol/L-5mmol/L)对HUVEC的影响。观察指标:①倒置显微镜下观察HUVEC形态学变化;②电镜观察HUVEC超微结构改变;③细胞活力的测定;④细胞培养液MDA含量的测定;⑤细胞培养液SOD活性的测定。
结果
1.Sp对大鼠胸主动脉环张力的影响:①内皮完整含Ca<2+>液中,精胺对NA和高钾预处理的血管环无明显影响;②内皮完整含Ca<2+>液中,精胺(50μmol/L-200μmol/L)呈浓度依赖性使血管收缩;③无Ca<2+>Krebs液中,精胺(200μmol/L)无缩血管作用;④含Ca<2+>去内皮条件下,精胺(200μmol/L)对正常血管有收缩作用,但弱于内皮完整者;⑤含Ca<2+>Krebs液预先加入Vp精胺(200μmol/L)对正常血管无作用;⑥加入咖啡因引起血管短暂而快速收缩后,加入200μmol/L精胺缩血管效应降低;⑦内皮完整含钙液加入200μmol/L精胺后,再加入30mmol/L咖啡因后,不进一步引起血管收缩。2.Sp对传代培养的HUVEC的影响:培养的HUVEC加入Sp(50μmol/L-5mmol/L)后,50μmol/L的Sp对HUVEC的观察指标与正常对照组比较,无统计学意义(P>0.05);200μmol/L、1mmol/L、5mmol/L的Sp对HUVEC有损伤作用。表现为细胞活力降低,超微结构损伤,MDA含量升高,SOD活性降低。
结论
(1)Sp(50μmol/L-200μmol/L)呈浓度依赖性收缩血管平滑肌,其作用机制可能主要是通过 L-型钙通道开放来促进血管平滑肌外钙内流,并进一步诱导内钙释放,也可能与内皮细胞释放的某些舒缩血管因子有一定关系。(2)Sp引起HUVEC不同程度的损伤,其作用机制可能与细胞膜脂质过氧化,产生大量氧自出基有关。