【摘 要】
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该研究使用VL通用引物,应用PCR技术由抗人bFGF杂交瘤4a2细胞株经反转录合成第一链cDNA,扩增获得轻链可变区基因.PCR产物定向克隆进载体Bluescript M13,分别由二头 对PCR产物
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该研究使用VL通用引物,应用PCR技术由抗人bFGF杂交瘤4a2细胞株经反转录合成第一链cDNA,扩增获得轻链可变区基因.PCR产物定向克隆进载体Bluescript M13,分别由二头 对PCR产物进行双脱氧法序列测定.基因DNA序列测定结果及由DNA推导氨基酸序列分析表明 :抗人bFGF 4a2 VL基因长为330bp,共编码110个氨基酸.通过国际联机检索进行EMBL和Kabat基因库扫描,发出4a2轻链可变区基因仅与Ig洞源,应归性于Ig的Vk基因.构建重组体的 前提是从杂交瘤细胞中分离Ig的轻、重链可变区(VL、VH)基因,VH和VL共决定抗体的特异性和新和力,该研究成功获得4a2Vk基因为进一步构建和表达单链Fv(ScFV)抗体打下良好基础 ,将为国内外肿瘤的防治及研究bFGF与肿瘤发生、发展关系的分子机制提供科学的依据.
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