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本课题主要以薄层色谱法、高效液相色谱法为主要分析测试手段,并结合指纹图谱研究建立贵州余庆吴茱萸GAP基地规范化种植药材综合质量评价方法,为吴茱萸品质优劣和GAP规范化种植、种植标准操作规程的制定以及吴茱萸真伪鉴别和质量监控提供科学依据,并依据研究结果建立高于《中国药典》的企业内控质量标准。研究结果如下:
1.贵州余庆吴茱萸GAP基地规范化种植药材薄层色谱指纹图谱研究对吴茱萸薄层色谱指纹图谱进行了系统研究,首次建立了吴茱萸薄层色谱指纹图谱,12批余庆吴茱萸药材、9个不同产地吴茱萸药材以及两伪品检测结果表明,贵州余庆产吴茱萸药材相似性较大,品质差异小:不同产地样品相似性较大,但品质差异较大;两伪品花椒、马桑子没有吴茱萸薄层色谱指纹特征。该方法简单易于操作,便于推广应用。可用于采购及生产中的快速检验。
2.贵州余庆吴茱萸GAP基地规范化种植药材HPLC指纹图谱研究对吴茱萸HPLC指纹图谱进行了系统研究,测定了12批余庆吴茱萸药材、9个不同产地吴茱萸药材以及两伪品(花椒,马桑子),建立了吴茱萸药材指纹图谱方法和参照指纹图谱,该指纹图谱方法经方法学考察,精密度、稳定性、重复性良好;标示出吴茱萸药材的22个共有峰。吴茱萸的主成分组成基本相同,但各组分的含量有差异;2种伪品的主成分组成均有较大差异。
综上:以上两法可推广作为贵州余庆产吴茱萸药材的真伪、优劣的鉴别手段,能为贵州余庆吴茱萸申报地理标志产品提供强有力的技术支撑。
3.贵州余庆吴茱萸GAP基地规范化种植药材系统质量考察3.1不同采收年份吴茱萸总碱含量及产量的对比研究不同采收年份吴茱萸总碱含量及产量的对比研究表明:吴茱萸总碱的动态积累与生长、发育周期密切相关。一般移栽后3年挂果,采收的吴茱萸含量高于《中国药典》要求,但产量较低;随生长年限的增加,吴茱萸产量及总碱含量增加;移栽后第5年产量及总碱含量趋于稳定,采收的药材质量为最佳。
3.2不同采收月份吴茱萸总碱含量及产量的对比研究不同采收月份吴茱萸总碱含量及产量的对比研究表明:7月初吴茱萸开始挂果,其吴茱萸总碱的积累受时间影响较为明显,8月至9月吴茱萸总碱含量逐渐增加,产量也逐渐增加;9月中旬时,吴茱萸总碱含量最高,产量也最高:10月至11月时,其吴茱萸总碱含量和产量均有所下降。故建议吴茱萸采收时间以9月中旬为最佳。
3.3不同产地吴茱萸总碱含量的对比研究研究结果表明:不同产地吴茱萸的质量有明显差异,贵州余庆产吴茱萸质量最佳;吴茱萸总碱含量高达1.991%以上,高于《中国药典》规定的10倍以上。初步说明贵州余庆为吴茱萸最佳生长适宜区,建议可在贵州余庆进一步扩大吴茱萸种植规模。
3.4不同初加工方法对吴茱萸总碱含量影响的对比研究研究结果表明:不同初加工方法对吴茱萸总碱含量有显著影响,50℃烘干时外观表面为绿豆色或黄褐色,其吴茱萸总碱含量达到1.991%;阴干、40℃、60℃、70℃处理时吴茱萸药材外观色泽欠佳,其吴茱萸总碱含量与50℃烘干相比明显下降;晒干与50℃烘干相比其外观色泽和有效成分含量虽相差不大,但晒干受天气限制较为严重:阴干时,如通风不好或翻动不勤,易致霉变,同时外观色泽较差,因此建议吴茱萸不宜用阴干法干燥,应采取50℃烘干为最佳。