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本研究以檀香(Santalum album L.)成年优树半木质化嫩枝和种子苗不同部位为外植体,利用细胞全能性及其发育调控理论,采用丛芽发生和器官发生途径进行该树种的组织培养技术研究。通过细胞学观察,探讨檀香不定根的起源。系统的研究了檀香组培苗移栽管理技术。研究取得的主要结果如下:
1.用1000 mg/L GA3浸种16 h能有效打破檀香种子的休眠。处理后的种子接入MT培养基,2 d后种子开始萌发,萌发率可达90%以上。去掉外种皮,能提高种子的萌芽整齐度。
2.以种子苗不同部位为外植体,直接诱导不定芽效果较好的培养基为:MT+2mg/L6-BA+0.2 mg/L IAA,诱导率达100%;其中以子叶节和接近子叶节的下胚轴出芽较早并且生长快;接近胚根的下胚轴出芽稍晚,但不定芽数多,可达30个以上。
3.以檀香成年优树的嫩枝作为外植体,建立檀香组培再生系统。腋芽诱导效果较好的培养基为:MS+1.0 mg/L6-BA+0.1 mg/L NAA+50 g/L蔗糖+5.6 g/L琼脂粉,接种后10 d左右叶柄脱落,腋芽开始膨大、生长,诱导率达到56.75%。增殖效果较好的培养基为:MS+0.5 mg/L6-BA+0.05 mg/L ZT+0.5 mg/L GA3+0.05 mg/L NAA+50 g/L蔗糖+5.6 g/L琼脂粉,pH值5.8,增殖系数达4.6以上。最佳发根处理:用200 mg/L IBA处理茎段30 min后接入培养基MS+0.4 mgA,E+3.0 mg/L mA+0.01.mg/L NAA+15.0mg/L Vc+30 g/L蔗糖+5.6 g/L琼脂,20 d生根率可达80%,且根多而粗壮。从檀香细胞解刨学观察和生根试验观察可以看出,檀香组培生根属愈伤组织生根类型。
4.以檀香成年优树的嫩枝作为外植体,初步建立檀香体细胞胚胎发生体系。体胚诱导与增殖效果较好的培养基为:MS+0.5 mg/L6-BA+1.0 mg/L IAA+500 mg/L水解络蛋白+30 g/L糖+5.6 g/L琼脂粉;诱导体胚成熟效果较好的培养基为:MS+0.2 mg/L6-BA·+0.01 mg/L NAA+1.5 mg/L GA3+30 g/L艚+5.6 g/L琼脂粉,体胚在Mso培养基中也能萌发成苗。
5.寄主植物试验表明:寄主植物对檀香幼苗的生长是必需的。假蒿在檀香苗换袋后60 d内插入有利于檀香苗的生长。
6.较系统地研究了檀香组培苗移栽管理技术,移栽成活率可达70%以上。