海洋低温解烃菌的解烃特性及所产乳化剂的理化性能研究

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石油烃对环境产生的污染是目前全球普遍关注的焦点问题,生物修复是治理石油烃污染最为有效的途径之一,该技术具有高效、经济、无二次污染以及应用范围广等优点。因此,石油烃的生物降解研究具有重要的现实意义。   由被石油污染的海底油泥中,通过富集分离培养,选育出两株海洋低温石油污染降解菌T7-2和T7-7。采用多相分类技术,初步鉴定T7-2菌株为红平红球菌属,命名为Rhodococcus erythropolis T7-2,T7-7菌株属极小单胞菌属的一个新种,命名为嗜油极小单胞菌Pusillimonas oleiphila T7-7。对烷烃降解结果显示,T7-2能够降解由C12~C36范围的正烷烃,是目前国内报道的在低温海洋环境下降解范围最广泛的菌株。   对筛选出低温解烃菌的培养和烃降解条件进行了较深入的实验研究,确定了适合菌体生长和底物利用的最佳条件,充分发挥了菌种对石油烃的降解潜力。通过单因素实验确定以工业乙醇为碳源的种子培养基新配方,可使菌浓达1×109CFU/mL,且不会增加污染负荷。   对T7-2菌株所产的乳化剂进行了分离纯化并对其化学组分及理化性质进行了研究。研究结果表明,该生物乳化剂是由糖、脂类和蛋白质三种化学成分组成,其中含糖类物质为55.43%,含脂类物质为31.24%,含蛋白类物质为12.65%。该产乳化剂的单糖组分为甘露糖和鼠李糖;乳化剂的脂类由4种脂肪酸组成,它们分别为十碳脂、十二碳、十六碳及十八碳脂肪酸;乳化剂的蛋白组分是由16种氨基酸组成,其主要氨基酸为极性氨基酸和非极性氨基酸氨。该乳化剂性能稳定,耐受pH、温度、盐度等的范围均较宽,在海洋石油污染的生物修复方面具有很好的应用前景。   采用响应面法优化了T7-2菌株在海水中降解柴油补加营养的条件,得到各响应因素的最优水平,优化后的加富海水培养基成分为:在海水中补加(NH4)2SO42.53g/L、Na2HPO42.75g/L和酵母粉10.19 mg/L。经过对加富海水培养基中营养条件优化后,柴油各组分的降解能力明显提高,降解率达到75.09%,比优化前提高约15%,具备进一步应用研究的潜力。   探讨了T7-2与T7-7菌株对柴油降解的协同作用;结果表明,两株菌的混合培养可加快对柴油的降解过程,加入T7-2产的乳化剂也可明显提高T7-7对柴油的降解率。混合菌培养7天,可使孤岛稀原油几乎完全被降解;对含高胶质沥青质的官69稠油也有较好的降解作用;说明使用混合菌群进行海洋石油污染的生物修复具可行性。
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