含RGD序列的双功能溶栓分子的研究

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心血管疾病是一种当代社会的常见病、多发病,常用的主要治疗之一是溶栓疗法,构建了一种以单链尿激酶型纤溶酶原激活剂(scu-PA)为母体的具有抗血小板聚集活性的溶栓分子.通过将RGD序列引入scu-PA,从而通过RGD序列与粘附蛋白竞争活化的血小板膜受体GPIIb-IIIa,在不影响scu-PA的纤溶酶原激活活性的基础上,竞争性地抑制粘附蛋白与GPIIb-IIIa的结合,使其既具有溶栓活性又具有抗栓功能.作者在scu-PA的K区118位Gly与199位Leu 之间插入RGD序列.重组基因经限制性酶切鉴定、PCR鉴定、测序后,电转化至甲醇酵母PichiaPastorisGS115株中.利用B.BraunBiotech.International的BIOSTATCT5发酵罐进行scu-PA的分泌表达,经金属离子螯合亲和层析与S强阳离子交换层析,得到纯蛋白.
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