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粉刺是发生于毛囊皮脂腺的慢性炎症疾病。炎症是粉刺发生的重要病理过程,控制炎症是控制痤疮的主要环节。炎症的形成是多因素的作用结果,促炎症因子在粉刺炎症发生的早期起着重要作用。本研究目的在于通过科学模拟体内粉刺炎症的发生过程,构建体外高通量筛选模型,获得能够有效治疗粉刺炎症的中草药。
本研究表明,10μml的脂多糖可以刺激HaCaT人角质细胞的TNF-α分泌量增高一倍,50μg/ml的佛波酯可以刺激HaCaT人角质细胞的PGE2分泌量增高五倍,因此以TNF-α、PGE2促炎症因子为靶标,成功建立了抗炎物质的体外筛选模型。即将待筛选的物质加入HaCaT人角质细胞培养物中,同时加入脂多糖/佛波酯刺激体外培养的HaCaT人角质细胞产生炎症因子,培养24小时时间后,通过酶联免疫(ELISA)法测定各炎症因子的含量,对比空白组和模型组,以抑制系数评估天然物质的抗炎活性。结果表明,以脂多糖/佛波酯刺激角质细胞分泌炎症因子模拟体内粉刺炎症的发生具有一定的科学性,可行性。
根据建立的筛选模型,大量的药物筛选表明,在不损害细胞活力的情况下,川芎,柴胡等醇提物,熊果酸,黄芩苷等具有良好的抑制TNF-α分泌的活性;防己醇提物具有良好的抑制PGE2分泌的活性。进一步的研究表明,川芎与柴胡醇提液具有联合协同抑制TNF-α分泌的活性,且川芎抗炎有效物质处于其大孔树脂50%乙醇洗脱部位。