【摘 要】
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应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获得两株新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)基因cDNA，然后定向插入真核表达质粒pcDNA3中，构建了含HN基因的重组质粒。首先，将NDVLasota株和
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应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获得两株新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)基因cDNA，然后定向插入真核表达质粒pcDNA3中，构建了含HN基因的重组质粒。首先，将NDVLasota株和F48E9株分别接种于9日龄SPF鸡胚，于37℃孵化36h，置4℃12h后收获鸡胚尿囊液。根据GenBank登录的这两株病毒的HN基因序列和pcDNA3的多克隆酶切位点，分别设计两对引物P1：5-CCCAAGCTTATGGACCGCGCCGTTAGCCAAG-3，P2：5-GCTCTAGACTAGCCAGACCTGGCTTCTC-3和P3：5-CGGGATCCATGGACCGTGTAGTTAGCC-3，P4：5-CCGCTCGAGTTAAATCCCATCATCCTTGAG-3。通过RT-PCR从接种病毒的鸡胚尿囊液中分别获得含两株NDVHN基因cDNA。琼脂糖电泳结果显示，其大小均约为1700bp，与GenBank登录的大小一致。其次，将HN基因cDNA定向插入pcDNA3中。
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