【摘 要】
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Fad24（factor for adipocyte differentiation24）是一个与脂肪细胞分化密切相关的基因。已有的研究显示,fad24在肌原细胞的分化过程中呈现动态表达,而且该基因缺陷可导致斑马鱼的肌肉发育不良,这预示着fad24可能对成肌分化也具有调节作用,但其作用机制目前尚不明确。本研究利用小鼠C2C12细胞为模型,旨在系统分析fad24对成肌细胞增殖和分化的调节作用。我们利
【基金项目】
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国家博士点基金;国家重点基础研究规划项目;国家自然科学;；
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Fad24（factor for adipocyte differentiation24）是一个与脂肪细胞分化密切相关的基因。已有的研究显示,fad24在肌原细胞的分化过程中呈现动态表达,而且该基因缺陷可导致斑马鱼的肌肉发育不良,这预示着fad24可能对成肌分化也具有调节作用,但其作用机制目前尚不明确。本研究利用小鼠C2C12细胞为模型,旨在系统分析fad24对成肌细胞增殖和分化的调节作用。我们利用RNA干扰技术抑制成肌细胞中fad24的表达,然后对细胞增殖、细胞周期进程、细胞周期调控基因和分化标记基因的表达、以及细胞分化形态进行了观测和分析,证实了fad24基因对成肌细胞增殖和分化的影响,并对其机制进行了初步的探讨。本论文获得的主要结果如下： 1.定量检测了fad24基因在C2C12细胞分化前后的表达水平,发现该基因在未分化的细胞中即有表达,在成肌分化后上调,并在第6h达到峰值,随后下降。这表明fad24可能对成肌细胞的增殖和早期分化有调节作用。 2.在增殖阶段,敲减fad24可明显抑制C2C12细胞数目的增加。与之相对应,抑制fad24表达可显著下调细胞周期蛋白CylinD1、 CyclinE、 CyclinA以及细胞周期蛋白依赖性激酶CDK2和CDK4的表达,而上调CDK抑制剂P21的表达。流式细胞分析也显示,fad24基因表达被敲减的成肌细胞会被阻滞在G1期。这说明fad24可通过调控细胞周期进程来影响成肌细胞的增殖。 3.在成肌分化过程中,敲减fad24基因可显著下调C2C12细胞中myoD与Myf5的表达,进而抑制成肌分化进程并最终导致肌管融合率下降。这说明fad24基因可通过对成肌分化关键基因的调控来影响成肌细胞的分化过程。
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