【摘 要】
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目的：肝脏缺血再灌注损伤的发生是一个复杂、多因素的过程,其中包含炎症反应、氧化应激以及细胞凋亡等会对肝脏细胞造成极大损害的过程。小檗碱是一种临床常用的抗炎症反应的
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目的：肝脏缺血再灌注损伤的发生是一个复杂、多因素的过程,其中包含炎症反应、氧化应激以及细胞凋亡等会对肝脏细胞造成极大损害的过程。小檗碱是一种临床常用的抗炎症反应的药物,近年来研究表明小檗碱还具有抗氧化应激和抑制细胞凋亡的作用。本实验旨在研究小檗碱对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其相关机制。方法：健康雄性SD大鼠24只,周龄8-10周,体重200-250g,采用随机数字表法分成3组：假手术组(A组),对照组(B组)和小檗碱组(C组),每组8只。A组仅进行开关腹操作。B、C组采用改良的胡建平等方法行在体原位冷缺血再灌注。本实验模型中将胡建平等方法中原有的流入道脾静脉改为门静脉,将原有的流出道右肾上腺静脉改为肝下下腔静脉。增大了流出道口径,避免肝脏灌注时水肿的发生。C组于手术前14d给予小檗碱灌胃。B组于术前14d给予等量生理盐水灌胃。于术后6h取大鼠血液标本测定大鼠血清ALT和AST浓度,应用双抗体夹心酶联免疫(ELISA)法测IL-1β,IL-6评估肝脏炎症反应情况；取肝组织,观察肝脏组织形态学变化；ELISA法测定组织MDA和SOD含量,评价肝脏组织氧化应激损伤情况；检测肝脏组织caspase-3的活性；TUNEL法检测细胞凋亡的情况。数据应用SPSS17.0进行统计分析处理,计量资料以均数±标准差(x±s)表示。组间比较采用单因素方差分析,P<0.05为差异具有统计学意义。结果：A组大鼠血清ALT、AST、IL-1β、IL-6和MDA含量均比B、C组低(P<0.01),A组肝脏组织SOD含量高于B、C两组(P<0.01)。C组与B组相比大鼠血清ALT、AST、IL-1β和IL-6浓度含量均降低(P<0.05)。与B组相比较,C组肝组织MDA含量降低(P<0.05)而肝组织SOD含量升高(P<0.05)。C组凋亡水平及capase-3的表达均低于B组(P<0.05)。组织病理中A组为正常肝脏组织结构,B、C组肝脏组织出现程度不同的损伤。B组肝组织损伤明显,C组肝组织损伤较B组轻。结论：1、本研究采用的大鼠肝脏冷缺血再灌注模型包含冷灌注、再复流过程,能模拟肝移植供肝灌注、再植过程。术后6h,转氨酶升高,肝脏存在组织病理学损伤,提示建模成功；2、小檗碱对大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤具有保护作用,表现为转氨酶ALT、AST水平降低；细胞因子IL-1β和IL-6水平降低；MDA水平降低,SOD水平升高；凋亡细胞数减少；caspase-3的活性降低。其机制可能与小檗碱抑制冷保存肝脏炎症反应的发生和氧化应激反应,减轻冷保存肝脏细胞凋亡等作用机制有关。
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