【摘 要】
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为阐明家蚕生殖发育的调控机制，在家蚕基因组、EST数据以及芯片数据分析的基础上，本文对果蝇中已报道的生殖质决定相关基因在家蚕中的同源基因进行了鉴定，从FlyBase下载果蝇生殖质形成相关基因18个，通过与家蚕基因组数据进行BLAST比对分析，发现13个基因在家蚕中均有同源基因，并对其表达模式进行了分析。然后对高度保守的mago nashi基因进行了克隆和原核表达。克隆的mago nashi基因完整
【机 构】
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四川省农业科学院蚕业研究所,南充 637000 西南大学蚕学与生物技术学院,农业部蚕桑学重点开放实
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为阐明家蚕生殖发育的调控机制，在家蚕基因组、EST数据以及芯片数据分析的基础上，本文对果蝇中已报道的生殖质决定相关基因在家蚕中的同源基因进行了鉴定，从FlyBase下载果蝇生殖质形成相关基因18个，通过与家蚕基因组数据进行BLAST比对分析，发现13个基因在家蚕中均有同源基因，并对其表达模式进行了分析。然后对高度保守的mago nashi基因进行了克隆和原核表达。克隆的mago nashi基因完整的编码区序列为441 bp，编码146个氨基酸残基。该基因位于nscaf2655上，只有一个完整的拷贝，在基因组上有1611bp，共有两个外显子，外显子/内含子边界处均符合GT/AG规则。RT-PCR检测了该基因在发育各时期各组织器官的表达情况，发现该基因在所检测的所有发育时期、组织器官均有表达，是一个非特异表达基因。将家蚕mago nashi基因的编码区序列克隆到原核表达载体pET28-a中，并将构建成的pET-mago nashi重组质粒转化表达宿主菌Escherichia coliBL21(DE3)细胞，IPTG诱导后进行SDS-PAGE检测分析。结果表明，同对照相比，重组质粒在23.5KD处有一条十分明显的新增蛋白带，与预测的蛋白质大小一致，说明该基因体外重组表达成功。
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广西二十年来，采用秋水仙碱对桑树60个杂交组合的实生苗1.5万株诱导四倍体，经有效的培育和选择，育成600多份四倍体种质。对大部分四倍体种质进行了性状的调查、产叶性能测定、叶质鉴定和杂交结实性试验等方面的评价。获得一批高产型、优质型、高产优质型、及结实性高、配合力好等优异桑树四倍体种质。以四倍桑种质为亲本以2n×4n、4n×2n、4n×4n形式配成三倍体组合和四倍体组合共219个，育成了“桑特优1
昆虫能够特异性识别同类异性。雄蚕蛾对雌蚕蛾感知定位的过程中，性信息素结合蛋白PBP1、气味受体OR1和OR2起重要作用。本试验克隆得到了野桑蚕的性信息素结合蛋白基因pbp1和气味受体基因or1、or2。序列分析发现，桑蚕与野桑蚕这3个基因变异数目分别为4个、5个、4个，氨基酸变异位点数目分别为2个、1个、1个；氨基酸的分子量和等电点有细微差异或无差异；PHD预测的二级结构发现，变异位点对附近区域的
以非减数分裂孤雌生殖（AMP）和双精雄核发育（BSA）技术获得的家蚕单一性别早期发育蚕卵为材料，利用抑制消减杂交技术构建了消减杂交cDNA文库。在正向（雌性）消减文库中随机选择61个克隆测序，获得43种cDNA序列，长度在88～479bp之间；在反向（雄性）消减文库中随机选择46个克隆测序，获得29种cDNA序列，长度在132～724bp之间。对两个消减文库所测序列进行生物信息学分析显示与单性生殖
信号失活是嗅觉动态过程的一个重要步骤，这一过程包括多样的气味降解酶类。本文利用RT-PCR方法从家蚕蛾的触角中克隆了一个细胞色素P450基因CYP6AE21。该基因含有一个1572bp的ORF，编码一个推定的523个氨基酸的蛋白质。CYP6AE21推定的分子量为60.5kD，等电点为8.4，含有细胞色素P450的特征序列血红素结合位点区域。CYP6AE21和家蚕CYP6AE2基因一样在相同位置含有
果蝇l(3)neo18基因可以通过P转座子诱发致死突变，编码的蛋白质具有NADH脱氢酶（ND）的功能。利用生物信息学、RACE和RT-PCR等方法克隆了家蚕l(3)neo18同源基因，分析了基因结构与表达谱。Bm-l(3)neo18基因(EU826676)的cDNA全长为868bp，由573bp的完整开放读码框(ORF)序列、25bp的5′端非翻译区序列(5′UTR)和251bp的3′端非编码区序
VASA样蛋白是决定生殖系发育的重要调控蛋白因子之一，具有广泛的保守性，vasa的表达被认为是生殖细胞中最可靠的分子标记。为研究家蚕vasa样基因（Bombyx mori vasa-like gene,Bmvlg）启动子在时空上的调控机制，通过PCR克隆了家蚕Bmvlg的启动子，构建了由Bmvlg启动子驱动报告基因DsRed的表达载体，并利用家蚕BmN细胞和蚕卵进行了瞬时表达研究。序列分析结果显示
脱氧羟腐胺赖氨酸合酶和脱氧羟腐胺赖氨酸羟化酶是催化真核翻译起始因子序列中羟腐胺赖氨酸合成的两个酶。羟腐胺赖氨酸的合成是真核翻译起始因子活化成熟的标志，对真核细胞的存活及增殖具有重要作用。本文利用生物信息学、RACE和RT-PCR等方法克隆了家蚕脱氧羟腐胺赖氨酸合酶和脱氧羟腐胺赖氨酸羟化酶的同源基因BmDHS和BmDOHH，分析了基因结构和表达谱。BmDHS和BmDOHH的cDNA全长分别为1311
基于丰富蓖麻蚕微孢子虫分子生物学信息的目的，用特异性PCR方法扩增克隆了其核糖体基因全序列，全长4314bp。包括核糖体大亚基基因（LSUrRNA）2497bp，内转录间隔区（ITS）188bp，核糖体小亚基基因（SSUrRNA）1232bp，基因间隔区（IGS）282bp和5S区域115bp。研究结果同时表明，蓖麻蚕微孢子虫与家蚕微孢子虫（Nosema bombycis）、斜纹夜蛾微孢子虫（No
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