民族药黑果枸杞ISSR反应体系的建立与优化

来源 :中国植物学会第十四届全国药用植物及植物药学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yyy_chj
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  建立并优化黑果枸杞的ISSR 反应体系.采用改良试剂盒法提取黑果枸杞幼叶中的基因组DNA,运用正交试验与单因素结合的方法确立适合的ISSR-PCR 反应条件.黑果枸杞的最佳反应体系(20μL)为:模板DNA 35 ng,Taq DNA 聚合酶0.044 U/μL,引物0.253 μmol/L,dNTPs 0.11mmol/L,10×Buffer(含Mg2+)3.13 mmol/L,从ISSR 引物中筛选出13 条ISSR-PCR 引物并确定最佳退火温度.该体系稳定,条带多且清晰,可用于黑果枸杞遗传分析.
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