小麦锌指蛋白基因的克隆、序列与表达分析

来源 :2004北京植物分子生物学与生物信息学国际研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangwei4833250
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根据R基因及其调控基因保守序列设计简并性引物,对白粉菌接种和未接种处理的一对抗病和感病的小麦-黑麦等位突变易位系TAM104R和TAM104S总RNA进行RT-PCR扩增,得到一个诱导表达cDNA片段.序列分析表明,该片段全长2 474bp,其中含有一个822 bp的完整开放阅读框,推测其编码一个有273个氨基酸残基、分子量约31kD的蛋白质分子.蛋白质的氨基酸序列比对显示,该蛋白质分子具有C<,2>HC锌结合motif C×2C×4H×4C结构和锌指domain,可见克隆的cDNA是一个锌指蛋白基因,命名为TaZF.Southern杂交表明,TaZF在抗病易拉系TAM104R的基因组中是多拷贝的.半定量RT-PCR分析显示,TaZF基因属组成型表达、但受白粉菌诱导表达上调的基因,推测其与白粉病菌的侵染过程相关.基因组DNA专化扩增、克隆和测序揭示TaZF基因无内含子.
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