猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白功能性片段的原核表达及其免疫保护研究

• 作 者: 李耿;雷连成;孙长江;赵瑞利;韩文瑜;
• 机 构: 吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062
• 出 处: 2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会
• 发表日期: 2007年期

目的：表达猪链球菌2型(SS2)溶菌酶释放蛋白(MRP)的功能片段(TMRP)并检测其对小鼠的免疫保护活性。
方法:将本室构建的重组克隆载体pMD-tmrp经BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切，将目的基因tmrp亚克隆至原核表达载体pGEX-3X中，转化E.coliBL21(DE3)，鉴定正确后，用IPTG诱导，谷胱甘肽亲和层析纯化GST-TMRP，免疫BALB/c小鼠，测定其免疫保护率。
结果:阳性重组菌经IPTG诱导表达了可溶性目的蛋白，经亲和层析纯化得到了高纯度的融合蛋白，免疫BALB/c小鼠后，免疫保护率可达60％。
结论:已成功获得了具有免疫活性的GST-TMRP。