禽流感病毒的血凝素(HA)瞬时表达可以促进转录调控因子NF-κB的活化

来源 :中国畜牧兽医学会2007年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jim2y
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禽流感是一种在世界范围内流行并危害严重的人畜共患病。世界卫生组织预测禽流感将在人类中大范围流行,因此人们必须立即采取行之有效的办法防止禽流感病毒的迅速传播。禽流感病毒是一类由囊膜包裹的RNA病毒,含有8个基因节段,共编码11种蛋白,其中血凝素是决定病毒致病力的主要因素,但目前有关HA与宿主细胞间相互作用的精细机制尚未研究清楚。为探索HA对宿主细胞的影响,我们分别从含有H5,H7和H9亚型禽流感病毒HA基因的质粒pMD18-Q5,-Q7,Q9(由陈晨博士馈赠)获得了相应的HA基因,并且分别将其亚克隆至真核表达载体pEGJFP-N1中。用质粒转染试剂盒(北京威格拉斯公司)将重组质粒pEGFP-N1-HA转染293T细胞,24-48h收获蛋白,应用商品化的各亚型HA阳性血清进行Westem-blot检测,证实各亚型HA基因均能正确表达。NF-κB是一种在炎症反应和免疫应答中调节多种基因表达的重要转录因子,因此我们将重组质粒pEGFP-N1-HA以及阴性对照质粒pEGFP-N1分别与NF-κB荧光报告质粒pNF-(B-Luc共转染293T细胞以检测HA对NF-κB的影响。 研究发现,在293T细胞中H5,H7和H9亚型流感病毒HA基因的表达所引起的pNF-κB-Luc的荧光强度明显高于转染pEGFP-N1和pNF-κB-Luc的阴性对照。实验证明,禽流感病毒HA对宿主细胞的影响作用与NF-κB调控的抗感染与免疫应答有关。
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