【摘 要】
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目的 拟明确miR-126对胃癌细胞血管内皮生长因子A(VEGFA)及其下游磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)和丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(MAPK/Erk)两条信号通
【机 构】
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330006 南昌大学第一附属医院消化内科
【出 处】
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The 14th Congress of Gastroenterology China(第十四届全国消化系病学术会议)
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目的 拟明确miR-126对胃癌细胞血管内皮生长因子A(VEGFA)及其下游磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)和丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(MAPK/Erk)两条信号通路上核心蛋白Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和细胞外调节蛋白激酶(Erk1/2)表达的调控作用,从而初步探讨微RNA-126(miRNA-126)影响胃癌细胞恶性表型的可能机制.方法 选取人胃腺癌细胞MKN-45做为实验细胞,分为空白组、miR-126慢病毒实验组、慢病毒对照组、miR-126寡核苷酸抑制组和寡核苷酸对照组.利用miR-126慢病毒和miR-126 LNA power inhibitor探针转染MKN-45细胞系,转染后72h观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达情况,感染效率＞70％,提取细胞总小RNA和总蛋白,利用实时定量PCR检测miR-126的表达情况,同时通过免疫印迹法检测VEGFA及其下游信号通路上核心蛋白Erk、Akt、mTOR的表达.结果 miR-126慢病毒实验组的VEGFA及其下游靶蛋白Akt、mTOR、Erk1/2的相对表达量均显著低于空白组(1.00±0.00比1.62±0.20,1.00±0.00比1.86±0.68,1.00±0.00比2.30±0.26,1.00±0.00比1.63±0.42,P均＜0.01),miR-126寡核苷酸抑制组的VEGFA及其下游靶蛋白Akt、mTOR、Erk1/2的相对表达量均显著高于空白组(3.46±0.48比1.62±0.20,2.89±0.21比1.86±0.68,4.03±0.42比2.30±0.26,2.18±0.27比1.63±0.42,P均＜0.01).结论 miR-126可调控胃癌细胞VEGFA及其下游靶蛋白的表达,胃癌中可能存在miR-126/VEGFA信号通路调控胃癌的血管新生.
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