【摘 要】
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目的 探讨微RNA(miRNA)-374b-5p及其靶基因reck在胃癌发生、发展中的作用.方法 采用MGC-803细胞建立BABL/c裸鼠人胃癌种植瘤动物模型,当种植瘤体积达到60 mm3左右时,随机
【机 构】
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421000 衡阳,南华大学附属第二医院消化科
【出 处】
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The 14th Congress of Gastroenterology China(第十四届全国消化系病学术会议)
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目的 探讨微RNA(miRNA)-374b-5p及其靶基因reck在胃癌发生、发展中的作用.方法 采用MGC-803细胞建立BABL/c裸鼠人胃癌种植瘤动物模型,当种植瘤体积达到60 mm3左右时,随机分为3组,每组5只：空白对照组、阴性对照组(体内转染无义序列)和miRNA-374b-5p抑制组(体内转染miRNA-374b-5p抑制剂),观察种植瘤生长情况.末次治疗后第3天处死各组小鼠,HE染色观察种植瘤标本的病理学特征；实时荧光定量PCR(quantitative real-time reverse transcription,qRT-PCR)检测种植瘤组织miRNA-374b-5p表达水平；荧光素酶活性检测验证miRNA-374b-5p是否靶向作用于reck基因；qRT-PCR、免疫组织化学分别检测种植瘤reck基因的信使核糖核酸(mRNA)转录水平和蛋白表达情况.结果 miRNA-374b-5p抑制组种植瘤的体积在转染开始9天后,均明显小于空白对照组和阴性对照组(P＜0.05),而空白对照组和阴性对照组种植瘤体积差异无统计学意义；miRNA-374b-5p抑制组的病理学检测提示种植瘤的恶性程度较空白对照组和阴性对照组下降；miRNA-374b-5p抑制组种植瘤的miRNA-374b-5p表达水平均显著低于空白对照组和阴性对照组(P＜0.05),而其余两组差异无统计学意义；荧光素报告载体系统证实reck基因是miRNA-374b-5p直接调控的靶基因；miRNA-374b-5p抑制组种植瘤的reck基因转录水平及蛋白表达水平均显著高于空白对照组和阴性对照组(P＜0.05),而其余两组差异无统计学意义.结论 miRNA-374b-5p可能通过reck基因通路在胃癌的发生和发展中扮演着癌基因的角色.
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