【摘 要】
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目的 探讨青藤碱(SN)体外抑制人肝癌细胞HepG2生长及诱导其凋亡的作用机制.方法 (1)采用形态学观察青藤碱处理前后细胞的形态学变化；(2)MTT和SRB法检测青藤碱对人肝癌细胞
【机 构】
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中南大学生物科学与技术学院细胞生物学系,长沙 410013
【出 处】
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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议
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目的 探讨青藤碱(SN)体外抑制人肝癌细胞HepG2生长及诱导其凋亡的作用机制.方法 (1)采用形态学观察青藤碱处理前后细胞的形态学变化；(2)MTT和SRB法检测青藤碱对人肝癌细胞HepG2的生长抑制作用；(3)流式细胞术分析了细胞周期分布；(4)Hoechst染色和流式细胞术分析青藤碱对细胞的凋亡作用；(5) RT-PCR方法检测survivin在mRNA水平的表达；(6)Western blot检测药物处理前后细胞中survivin蛋白的表达情况.结果 青藤碱能显著抑制人肝癌细胞HepG2生长,并具有时间浓度依赖性.青藤碱作用24 h、48 h、72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为(1.44±1.53)、(1.21±1.91)、(0.39±2.16)mmol/L.1.6 mmol/L青藤碱作用48 h后,Hoechst荧光核染,人肝癌细胞HepG2核出现聚缩、片段化和周边化,呈现典型的凋亡特征.FCM显示细胞被阻滞于G2/M期,随药物浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加.相对定量RT-PCR结果显示青藤碱能下调HepG2细胞survivin mRNA的表达.Western blot检测结果显示青藤碱可以抑制HepG2细胞survivin的表达,并随作用浓度的加大,survivin的表达量减低；并发现survivin在青藤碱作用24 h出现高表达.结论 青藤碱对人肝癌细胞HepG2有较强的抑制增殖和诱导凋亡作用,其机制可能与抑制survivin的表达有关.
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