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目的:构建含FasL基因的腺病毒载体,转染肝癌9204细胞株,观察FasL基因对9204细胞株的影响。
方法:以腺病毒作载体,把FasL基因克隆入腺病毒载体,构建成含FasL基因的转基因载体并酶切鉴定,用脂质体包裹法把含FasL基因的腺病毒载体转染HCC9204细胞株,用RT-PCR方法证实转染后有无FasL基因表达,采用电镜观察9204细胞形态学变化。
结果:酶切鉴定证实含FasL基因的转基因载体构建成功;RT-PCR显示转染后9204细胞株FasL基因表达水平显著高于未转染细胞株(p<0.01);(r)肝癌细胞株9204转染FasL基因72h后,在光镜下可见凋亡细胞体积缩小,生长不良,染色质浓缩,密度增高,胞核中出现颗粒样物质,电镜下可见凋亡小体。
结论:成功地构建了FasL基因的转基因载体;转染FasL基因可诱导肝癌9204细胞株出现凋亡。