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目的:建立人血浆中单胺类、氨基酸类神经递质及代谢产物的LC-MS/MS定量分析方法,并应用于精神分裂症病人和正常人的血样检测。
方法:血浆样品经丹磺酰氯衍生化预处理。色谱柱为Phenomenex Gemini C18(2.00mm×150mm,3μm),以乙腈-20mmol.L-1醋酸铵缓冲溶液(0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.250ml·min-1,电喷雾离了源(ESI)采用正离子模式,三重四极杆质谱仪采用多反应监测方式(MRM),对所建立的方法进行了较为全面的确证。考察了精神分裂症病人治疗前、治疗第3周和治疗第6周与正常人血浆中单胺类、氨基酸类神经递质及代谢产物浓度的差别。
结果:各待测物在所建测定范尉内线性关系良好,回归系数均人于0.99;DA、DOPAC、HVA、NE、VMA、MHPG、5-HT、5-HIAA、Glu、GABA的最低定量限分别为0.57,0.37,0.35,0.40,0.35,0.91,0.27,0.43,0.65,1.62 pmol·ml-1;日内精密度在1.5%~13.6%范围内,日间精密度在2.9%~13.7%范围内。精神分裂症患者组治疗前神经递质及代谢产物的浓度与正常组的存在差异,但经6周利培酮系统治疗后,除去甲肾上腺素外,绝人部分待测物浓度均逐渐恢复正常水平。
结论:所建方法灵敏、准确、简便,可用于血浆中痕量单胺类、氨基酸类神经递质及其代谢产物的测定。