牛病毒性腹泻病毒双单克隆抗体夹心ELISA检测方法的建立及初步应用

来源 :中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lyh198300
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为了建立特异性牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)抗原快速检测ELISA方法,用于BVDV抗原的快速检测。本研究用纯化的BVDV作为抗原,经动物免疫、细胞融合、间接ELISA筛选和亚克隆,得到了3株抗BVDV的单克隆抗体(2A6、2F4和5C9).选用单克隆抗体2A6和5C9包被ELISA板,用HRP标记的单克隆抗体2F4作为夹心抗体,建立了检测BVDV的双单克隆抗体抗夹心ELISA方法。通过对BVDV阳性样品、其它病毒阳性样品和阴性对照样品及系列稀释的阳性样品检测,表明该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性。用ELISA检测326份临床样品,结果表明该方法同RT-PCR和商品化ELISA试剂盒检测结果符合率分别为98.8%和99.0%。该方法可以用于BVDV抗原快速检测和对大量样本的筛选。
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