【摘 要】
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目的:构建整合素β1(integrinβ1,ITGB1)基因干扰慢病毒载体,并研究ITGB1对他莫昔芬耐药乳腺癌MCF-7细胞(MCF-7R)的迁移和侵袭能力的影响. 方法:针对ITGB1靶序列设计合成4
【机 构】
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400016重庆,重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科
【出 处】
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第六届/中-法(国际)乳腺癌高级学术论坛
论文部分内容阅读
目的:构建整合素β1(integrinβ1,ITGB1)基因干扰慢病毒载体,并研究ITGB1对他莫昔芬耐药乳腺癌MCF-7细胞(MCF-7R)的迁移和侵袭能力的影响.
方法:针对ITGB1靶序列设计合成4条shRNA序列及1条阴性对照序列NC,构建ITGB1RNAi慢病毒载体及对照病毒载体,并分别进行慢病毒包装,通过内源性筛靶,选取干扰效果最好的一组病毒感染MCF-7R细胞,Western blot检测ITGBl蛋白的表达水平;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力.
结果:成功构建4条慢病毒干扰重组质粒,并分别包装成病毒,通过内源性筛靶挑选出效果最佳的慢病毒组,感染MCF-7R细胞后ITGB1基因的蛋白表达量较空白对照CON组(p＜0.01)和阴性对照NC组(p＜0.01)明显降低,且细胞的迁移和侵袭能力明显弱于CON组(p＜0.01)和NC组(p＜0.01).
结论:慢病毒介导的shRNA可有效地干扰MCF-7R细胞中ITGB1的表达,并且抑制MCF-7R细胞的迁移和侵袭能力.
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