【摘 要】
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本研究根据酵母密码子偏爱性优化设计脂肪酶ROL基因,利用酿酒酵母表面展示表达系统,用连接肽将脂肪酶与酵母细胞壁成分8凝集素琏接3成功构建了重组酵母全细胞脂肪酶生物
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本研究根据酵母密码子偏爱性优化设计脂肪酶ROL基因,利用酿酒酵母表面展示表达系统,用连接肽将脂肪酶与酵母细胞壁成分8凝集素琏接3成功构建了重组酵母全细胞脂肪酶生物催化剂.首次报道将分子印迹技术和全细胞脂肪酶生物催化剂结合,显著提高了全细胞脂肪酶生物催化剂在有机相中的催化活性和热稳定性.将培养至稳定期的重组酵母菌离心收获,加入油酸混匀后冷冻干燥,获得的冻干粉经过数次正己烷的洗涤,除去印迹配体油酸,最后真空干燥去除溶剂,即可获得分子印迹全细胞脂肪酶生物催化剂.分子印迹法制备的全细胞脂肪酶生物催化剂成功应用于生物柴油的生物转化试验,在有机相中大豆油转化成生物柴油,转化率为77.71％,是非分子印迹组的5倍(15.46％).分子印迹全细胞脂肪酶生物催化剂于60℃反应27h,生物柴油的转化率高达(95.45±2.73)％,且参与反应的酵母细胞仍然活着,具有耐高温和耐有机溶剂的特性,这些特性对全细胞生物催化剂合成生物柴油的工业化生产有重要的积极意义.
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