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为了优选快速、灵敏、特异的家蚕微孢子虫Nosema bombycis分子检测方法和DNA抽提方法，本文通过对家蚕微孢子虫TaqMan探针荧光定量PCR检测方法和SYBR Green荧光定量PCR检测方法的建立以及反应体系优化，并与普通PCR方法进行比较；再采用4种不同DNA抽提方法分别对PCR和实时荧光定量PCR方法检测家蚕微孢子虫悬浮液的效果评价。结果显示，不经过DNA抽提，直接将家蚕微孢子虫发芽液进行PCR反应的效果优于其它方法，检测灵敏度由高到低依此为直接法、酚／氯仿抽提法、动物组织DNA试剂金抽提法和植物组织DNA试剂盒抽提法；TaqMan探针法检测家蚕微孢子虫发芽液的灵敏度和SYBR Green法相近，达到微孢子102个／mL，两者均优于普通PCR方法。试验表明，直接采用发芽液结合荧光定量PCR方法检测家蚕微孢子虫最为简便、快速、灵敏。该研究结果将有助于提高家蚕微粒子病监控技术和检疫能力，对家蚕微粒子病的检疫和防治具有积极意义。