【摘 要】
：
目的：构建携带星形胶质细胞升高基因-1 (AEG-1)的慢病毒载体并进行慢病毒包装,感染结直肠癌SW1116细胞建立稳定株,研究AEG-1与血管生成的关系及其调控血管生成的分子机制.方法：采用蛋白质印迹方法在多个结直肠癌细胞株中筛选出低表达AEG-1的细胞株,构建携带AEG-1的慢病毒载体,经PCR筛选阳性克隆及测序鉴定后,用psPAX、pMD2.G慢病毒包装系统共转染包装细胞293FT,包装产生
【机 构】
：
广东省人民医院广东省医学科学院广东省老年医学研究所消化内科 广州510080
【出 处】
：
第七届全国老年人常见疾病防治研讨会
论文部分内容阅读
目的：构建携带星形胶质细胞升高基因-1 (AEG-1)的慢病毒载体并进行慢病毒包装,感染结直肠癌SW1116细胞建立稳定株,研究AEG-1与血管生成的关系及其调控血管生成的分子机制.方法：采用蛋白质印迹方法在多个结直肠癌细胞株中筛选出低表达AEG-1的细胞株,构建携带AEG-1的慢病毒载体,经PCR筛选阳性克隆及测序鉴定后,用psPAX、pMD2.G慢病毒包装系统共转染包装细胞293FT,包装产生慢病毒,收集病毒液用以感染前期筛选出来低表达AEG-1的结直肠癌细胞株SW1116,采用嘌呤霉素筛选阳性细胞,细胞培养提取mRNA和蛋白分别进行qPCR和蛋白质印迹验证细胞模型,采用microRNA基因芯片筛选转染前后变化明显的miRNA,并采用qPCR和荧光素酶报告基因法验证,采用蛋白质印迹检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平.结果：测序结果证实,成功构建AEG-1的慢病毒载体,对结肠癌SW1116细胞株AEG-1表达的上调作用显著(P＜0.05),上调AEG-1的表达会明显抑制miR-34a (P＜0.01),转染后仅为对照组的0.016倍, 同时转染AEG-1后,HIF-1a和VEGF的表达明显升高(P＜0.05).结论：成功构建AEG-1慢病毒载体,AEG-1在结直肠癌中通过抑制miR-34a促进HIF-1α和VEGF的表达,从而发挥促进肿瘤血管生成的作用,在结直肠癌中可能通过AEG-1/miR-34a/HIF-1a/VEGF途径调控血管生成.
其他文献
过敏性紫癜是免疫球蛋白、C3和免疫复合物沉积在小动脉、毛细血管和小静脉的一种小血管炎，是常见的毛细血管变态反应，药物、食物多种原因均可导致。本例患者为老年高龄男性，入院后诊断重症肺炎并感染中毒性休克，治疗上抗感染序贯治疗选用的是头孢哌酮他唑巴坦钠，治疗10天后患者感染得到有效控制，在停用该药10余天后出现过敏性紫癜，同时在再次使用该药后出现快速加重的反应，主要表现为四肢皮肤的瘀点、瘀斑，无关节、消
目的：探讨"5+1"分阶段糖尿病达标管理模式在社区2型糖尿病管理中的应用效果并分析影响该模式在社区实施效果的主要原因.方法：自2011年6月至2013年9月在南京市鼓楼区所辖11家社区卫生服务中心连续纳入2型糖尿病患者，建立电子档案，并按照"5+1"分阶段糖尿病达标管理模式流程进行随访管理，比较管理前后患者血糖、血压、血脂达标率改善情况并分析影响该模式在社区实施效果的主要原因.结果：共计纳入基线及
目的：运用Meta分析的方法评价国人血同型半胱氨酸(HCY)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)及D-二聚体(D-D)水平与脑梗死的关系.方法：计算机检索万方数据库(2010.1-2013.12)、CNKI (2010.1-2013.12)、维普数据库(2010.1-2013.12)及手工检索相关会议文献与未公开发表的相关文章,收集国内2010年1月至2013年12月关于血
目的：评估北京市城乡社区老年人健康状况，为相关部门制定老年人健康保健、医疗、康复以及护理医疗服务政策和规划提供理论依据.方法：采取分层抽样方法，抽取北京市城区、郊区及山区各1个点.对2411名60岁及以上的老年人进行健康综合评估问卷调查，并进行身高、体重、血压、血常规、血生化等检测.采用2010年11月第六次人口普查北京市的老年人年龄构成比对数据进行调整和加权计算.结果：约半数老年人认为自己健康状
Objective: Variants in neuronal NOS (nNOS) gene were associated with atherosclerosis and stroke susceptibility.We aimed to investigate the association between nNOS gene polymorphism and risk of ischem
目的：调查广州市老人院安全文化的现状及影响因素.方法：采用便利抽样方法,运用修订版HSOPSC问卷对广州市8家老人院260名护士进行调查,采用多元线性回归模型分析广州市老人院安全文化的影响因素.结果：安全文化优势领域分别为"组织学习与持续改进"(91.2％),"园区内团队合作"(89.8％),"管理者促进安全的期望与行动"(79.9％)和"老人院管理者对老人安全的支持"(79.4％)；安全文化待改
Aims/hypothesis: To investigate the rate of anemia in Chinese type 2 diabetes patients, and whether anemia is associated with an increased risk of renal disease progression, as well as the interaction
目的：观察原发性高血压患者常规血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)及血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)治疗后，是否存在醛固酮逃现象及其区别.方法：入选123例原发性高血压的患者随机分成缬沙坦组(61例)和贝那普利组(62例)，用放射免疫法测定治疗前、治疗后1、3、6个月时的血压变化和血浆肾素(PRA)、血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、醛固酮(Ald)的活性，分析治疗前后PRA、AngⅡ、Ald的变化规律，
目的：近年来的研究提示急性肾损伤的发生率呈逐步上升趋势,急性肾损伤是患者短期或长期不良预后的危险因素,而急性肾损伤在老年人群中的发生率更高,合并急性肾损伤的老年患者住院期间死亡率高达l5～40％；因此,如何合理评估老年患者发生急性肾损伤的风险具有重要意义.既往研究指出,心血管疾病、糖尿病、慢性肾脏病及贫血等慢性疾病可能是发生急性肾损伤的易感因素,然而,在老年人群中如何合理评估基础疾病状态对急性肾损