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能量代谢异常是肿瘤十大特征之一,不同于正常细胞,肿瘤细胞无论在有氧或无氧条件下都以糖酵解为主要供能方式,这种现象被称为Warburg效应.因此,干预肿瘤细胞糖代谢,从根源上控制肿瘤细胞的能量来源,极有可能为肿瘤治疗带来新的机遇.糖代谢相关酶ALDOA是我们课题组前期利用质谱技术在肺鳞癌和配对癌旁组织中筛选出的差异表达蛋白,在肺鳞癌组织中蛋白表达显著高于癌旁组织.本研究以人肺癌细胞系H520和H157为模型,分别探讨ALDOA敲降或过表达对于肺癌细胞增殖和周期的影响及其作用机制.CCK8和克隆形成实验结果显示,与阴性对照组相比,ALDOA敲降能够抑制H520细胞的增殖；流式细胞术检测细胞周期发现,ALDOA敲降后H520细胞出现G1/S期阻滞；Western blotting结果显示,ALDOA敲降组H520细胞的CyclinDl、CyclinE1、CyclinA1、CyclinB1蛋白表达降低,CDK4、CDK6、CDK2、CDK1、P16、P21、P27蛋白表达无显著变化.鉴于ALDOA对于CyclinD1蛋白表达的显著影响,我们以Cyclin D1为主要线索探究ALDOA影响肺癌细胞增殖和周期的机制.免疫荧光和Western blotting结果显示ALDOA敲降组细胞核内CyclinD1蛋白含量显著降低,Cyclin D1核转运受体CRM1无显著改变；ALDOA敲降后CyclinD1下游磷酸化底物Rb的S780位点磷酸化显著降低,而Rb蛋白表达无显著改变；QPCR结果显示,ALDOA敲降后H520细胞的CyclinD1的mRNA显著减少；MG-132抑制蛋白质泛素-蛋白酶体降解途径后,ALDOA敲降组的CyclinD1蛋白含量仍显著低于对照组.鉴于ALDOA参与细胞糖代谢,我们迸一步分析了ALDOA对于肺癌细胞能量代谢影响.细胞内ATP浓度检测结果显示,ALDOA敲降组H520细胞的ATP浓度显著低于对照组；免疫荧光和Western blotting结果显示ALDOA敲降组的Warburg效应关键酶PKM2蛋白表达显著降低,且在细胞核内降低更为显著.以上实验均在H157细胞系中以ALDOA过表达的形式得到验证.综上,本研究初步证明ALDOA能够增加人肺癌细胞ATP产生,促进PKM2蛋白在细胞核内表达,调控Warburg效应,从而增加Cyclin D1的蛋白质合成及入核,促进入肺癌细胞的增殖和G1/S进程.