乳酸对LPS诱导的MIMVEC细胞信号通路NF-Κb的调控作用

• 作 者: 刘静;薛九州;朱志宁;任晓明;
• 机 构: 北京农学院动物科学技术学院,北京 102206
• 出 处: 中国畜牧兽医学会信息技术分会2011年学术研讨会
• 发表日期: 2011年期

目的：探讨乳酸抑制脂多糖(LPS)致大鼠肠粘膜微血管内皮细胞(MIMVEC)中核因子κ B(NF-κ B)P65表达的作用。
方法：原代培养MIMVEC，分为空白对照组、LPS阳性对照组、乳酸高浓度组、中浓度组和低浓度组，高、中、低浓度的乳酸预处理细胞3 h后，LPS处理细胞4 h，用ELISA方法检测TNF-α和IL-6的表达量。用荧光定量PCR方法对NF-Κb Mrna进行定量检测;用Western blotting的方法检测NF-κ B p65蛋白表达的变化。
结果：荧光定量PCR结果显示，LPS处理细胞4 h的乳酸高、中、低浓度组中NF-κ B Mrna的表达量是空白组对照的1.51倍、2.62倍、3.00倍，而LPS组中NF-κ B Mrna的表达量是空白对照组的7.36倍;Western blotting的结果显示，各组蛋白提取物中均存在分子量约为65 kd的、与兔抗NF-Κb P65多克隆抗体发生免疫阳性反应的蛋白条带，且乳酸高浓度组细胞中NF-κ B P66的表达与空白对照组相比差异不显著(P＞0.05);中浓度组和低浓度组细胞中NF-Κb P65的表达与空白对照组相比差异显著(P＜0.05)。LPS组NF-κ B P65的表达与其他各组相比均差异极显著(P＜0.01)。
结论：乳酸对LPS所致的MIMVEC细胞NF-κ B激活具有明显的抑制作用，下调了转录因子NF-κ B的转录活性，进而抑制了炎性因子TNF-α和IL-6的表达。