【摘 要】
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近年来,植物凝集素对肿瘤细胞的体外毒性作用成为抗肿瘤治疗和医药产品研究的热点.本课题基于表面等离子共振技术(SPR),并以两株肺癌细胞系A549和Calu-3为研究对象,考察
【机 构】
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上海交通大学药学院,中国上海市200240
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近年来,植物凝集素对肿瘤细胞的体外毒性作用成为抗肿瘤治疗和医药产品研究的热点.本课题基于表面等离子共振技术(SPR),并以两株肺癌细胞系A549和Calu-3为研究对象,考察了伴刀豆球蛋白A(Con A)和Ⅰ型槲寄生凝集素(ML-Ⅰ)对其体外毒性作用.试验中,夹心型检测体系在甘露聚糖固定化的SPR芯片表面建立：Con A作为受体蛋白,ML-Ⅰ作为探针蛋白,分别与两种细胞进行反应.根据SPR检测信号,确定了供试的最佳细胞浓度为2.5×105.SPR在线检测图谱显示：两种细胞与探针蛋白的反应信号存在较大差别,A549细胞的检测信号净值高于Calu-3细胞50％,表明A549细胞对ML-Ⅰ更加敏感.该检测方法首先适用于PBS缓冲液体系,其后在复杂的人血清体系中试验,发现血清中某些物质的存在降低了两种细胞株对ML-Ⅰ的敏感性.采用原子力显微镜对两种细胞的凋亡作用进行体外观察,结果表明A549细胞在ML-Ⅰ的作用下,细胞表面发生分解,而Calu-3细胞受到相同ML-Ⅰ的作用时,细胞表面变化较小.该结果与采用SPR技术获得的有关细胞体外毒性作用信息基本符合,进一步说明了该技术在细胞试验中的潜在应用价值.该技术与目前常规使用的生物检测技术相比,具有样品制备简单,节约时间、试剂的特点.本课题所建立的检测体系,具有发展为快速药物筛选技术的潜力,并有利于对植物凝集素与肿瘤细胞之间的作用机理深入研究.
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