【摘 要】
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目的:3,3,-二吲哚基甲烷(DIM)是十字花科植物的主要代谢产物之一,作为一种天然植物化学物的代表,具有显著的肿瘤预防作用.本研究拟探讨DIM对胃癌细胞的抑制效应与作用机制,以及其过程中自噬水平的改变.方法:为评价DIM对胃癌细胞的体外实验效应,选取BGC-823和SGC-7901作为胃癌细胞株,用0、40、60、80μM剂量的DIM处理这两种胃癌细胞48h后,分别用CCK-8试剂盒与平板克隆实
【出 处】
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中国环境诱变剂学会第七届全国会员代表大会暨第十七次学术大会
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目的:3,3,-二吲哚基甲烷(DIM)是十字花科植物的主要代谢产物之一,作为一种天然植物化学物的代表,具有显著的肿瘤预防作用.本研究拟探讨DIM对胃癌细胞的抑制效应与作用机制,以及其过程中自噬水平的改变.
方法:为评价DIM对胃癌细胞的体外实验效应,选取BGC-823和SGC-7901作为胃癌细胞株,用0、40、60、80μM剂量的DIM处理这两种胃癌细胞48h后,分别用CCK-8试剂盒与平板克隆实验检测细胞活力;为评价DIM对肿瘤生长的体内效应,在免疫缺陷裸鼠右侧背部皮下接种BGC-823胃癌细胞,成瘤后小鼠随机分成两组,实验组每天分别皮下注射DIM(10mg/kg),对照组注射DMSO.每隔3天记录肿瘤的体积和质量;此外,为评价在此过程中的自噬水平,分别检测了DIM作用与胃癌细胞BGC-823和SGC-7901后的LC3与ATG5等蛋白表达水平,以及体内实验两组瘤体中的LC3与ATG5等蛋白表达.同时激光共聚焦应用mRFP-GFP-LC3探索DIM对自噬流的影响.
结果:CCK-8与平板克隆实验均显示,DIM处理组胃癌细胞增殖明显降低,且呈剂量相关性;裸鼠实验也表明,DIM处理组与对照组相比,瘤体积增长相对较慢,动物处死后的瘤体积、瘤重体重比显著低于对照组;与对照组相比,DIM处理组的胃癌细胞中LC3-Ⅱ表达上调,且呈剂量相关性;裸鼠移植瘤的免疫组化和Western Blot结果均显示,DIM处理组肿瘤组织中的LC3-Ⅱ表达相对较高.激光共聚焦结果显示,DIM处理后显示红色与绿色荧光均共定位重合,说明自噬流被阻滞.此外,体内实验瘤体与体外胃癌细胞在DIM作用后ATG5表达均上调,且在ATG5siRNA作用后胃癌细胞增殖效应被逆转.
结论:体内实验与体外实验均表明,DIM对胃癌细胞增殖有抑制作用,在此过程中伴随自噬水平的改变,自噬流被阻滞.DIM作为一种有效的潜在胃癌防治化学物,其作用机制有待于进一步的探索.
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