【摘 要】
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目的:探讨LincRNA-p21通过p21诱导食管癌细胞周期阻滞的调控及其可能的机制.方法:应用RT-qPCR技术,检测LincRNA-p21在两株食管癌细胞株(EC109和EC9706)与一株永生化食管上皮细胞(Het-1A)中的表达情况.过表达LincRNA-p21及其阴性对照的慢病毒成功转染食管癌EC109后,通过流式细胞术检测食管癌EC109细胞的周期分布,EdU染色法分析EC109细胞的
【机 构】
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东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室,江苏南京210009
【出 处】
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中国环境诱变剂学会第七届全国会员代表大会暨第十七次学术大会
论文部分内容阅读
目的:探讨LincRNA-p21通过p21诱导食管癌细胞周期阻滞的调控及其可能的机制.
方法:应用RT-qPCR技术,检测LincRNA-p21在两株食管癌细胞株(EC109和EC9706)与一株永生化食管上皮细胞(Het-1A)中的表达情况.过表达LincRNA-p21及其阴性对照的慢病毒成功转染食管癌EC109后,通过流式细胞术检测食管癌EC109细胞的周期分布,EdU染色法分析EC109细胞的增殖改变.采用RT-qPCR和Western Blot技术分别检测LincRNA-p21下游基因p21的mRNA水平和蛋白表达水平.
结果:与Het-1A相比,在EC109和EC9706中LincRNA-p21和p21的mRNA水平分别为Het-1A的0.183和0.325倍(p＜0.05);p21的mRNA水平分别为Het-1A的0.480和0.423倍.慢病毒转染后,LincRNA-p21相对表达量增加约14860倍(p＜0.05),p21-mRNA上调约2.83倍(p＜0.05),流式细胞术周期分布结果显示,LincRNA-p21和阴性对照G1期细胞百分率分别(52.48±0.72)％和(54.92±1.52)％,S期分别(34.61±0.40)％和(32.54±0.80)％(p＜0.05),G2期分别(12.91±0.32)％和(12.54±0.85)％,EdU增殖分析结果显示两组细胞增值率分别为(44.40±1.73)％、(64.69±3.78)％.RT-qPCR和WB结果表明,过表达LincRNA-p21上调p21的mRNA水平和蛋白表达水平,下调cyclin D蛋白水平.
结论:LincRNA-p21促进p21表达,LincRNA-p21可能通过p21诱导食管癌EC109细胞G1/S期阻滞.
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