【摘 要】
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目的 探讨25％氙气后处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及保护作用时间窗.方法 50只成年雄性SD大鼠随机分为五组：假手术组(S组)(n=10)；对照组(C组)(n=10),单纯再灌注损伤,在胸主动脉开放后吸入25％氮气1小时(h)；25％氙气后处理时段组(Xe-P0,Xe-P1,Xe-P2组)(n=30),在胸主动脉开放后即刻、再灌注后1h、再灌注后2h分别吸入25％氙气1h.采用胸主动脉阻
【机 构】
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首都医科大学附属北京安贞医院 麻醉科
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目的 探讨25％氙气后处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及保护作用时间窗.方法 50只成年雄性SD大鼠随机分为五组：假手术组(S组)(n=10)；对照组(C组)(n=10),单纯再灌注损伤,在胸主动脉开放后吸入25％氮气1小时(h)；25％氙气后处理时段组(Xe-P0,Xe-P1,Xe-P2组)(n=30),在胸主动脉开放后即刻、再灌注后1h、再灌注后2h分别吸入25％氙气1h.采用胸主动脉阻断法造成脊髓缺血(25分钟)/再灌注损伤模型,观察再灌注后4h、24h、和48h后肢运动神经神经功能评分,并于再灌注后48h处死动物取脊髓(L5-7)制标本行病理组织学观察；采用尼氏染色法,评估脊髓神经元细胞形态变化；采用原位末端脱氧核糖核酸酶转移介导的脱氧尿三磷酸(dUTP)标记法(TUNEL法)检测神经细胞凋亡水平,采用免疫组化染色方法测定Bax,Bcl-2,caspase-3,caspase-9,Cyt-c等蛋白表达.结果 再灌注4h、24 h、48 h时,Xe-P1组大鼠后肢神经功能学评分均明显优于C组(P＜0.01),Xe-P0和Xe-P2与C组无统计学差异；再灌注后48h,S组脊髓组织结构清晰,神经元轮廓清晰、多极形,核仁清晰可见,胞浆均匀,胞质中尼氏体清晰.C、Xe-P1、Xe-P0和Xe-P2各组正常神经元不同数量减少,神经细胞不同程度受损,神经元胞质深染、缩小,细胞核固缩,核仁消失,胞体周围有空泡形成.但Xe-P1后处理组大鼠脊髓前角正常神经元数明显多于C组(P＜0.01),Xe-P0和Xe-P2与C组无统计学差异；S组脊髓组织少见细胞凋亡现象.与S组比较,C组、Xe-P1、Xe-P0和Xe-P2各组见到不同数量的凋亡细胞,凋亡阳性细胞的细胞核呈棕褐色,主要位于脊髓前角腹侧灰质、中央管周围灰质等区域.脊髓细胞凋亡指数A/I值均显著增加,差异有统计学意义(P＜0.01),但是Xe-P1组凋亡指数显著低于C组(P＜0.01),Xe-P0和Xe-P2与C组无统计学差异；S组脊髓组织少见Bax,Bcl-2,caspase-3,caspase-9,Cyt-c等蛋白表达.相对于C组、Xe-P0和Xe-P2组,Xe-P1组脊髓细胞中Bcl-2表达显著升高(P＜0.01),而Bax, caspase-3,caspase-9,Cyt-c等蛋白表达显著降低(P＜0.01).结论 25％氙气后处理对脊髓缺血再灌注损伤具有保护作用,保护作用时间窗在脊髓缺血再灌注后1小时.
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