【摘 要】
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目的 兔抗人胸腺免疫球蛋白(Rabbit Anti-human Thymocyte Globulin,ATG)是经批准上市用于预防移植器官排异的临床治疗药物,本研究探讨ATG替代-CD3单抗培养细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK),并检测其活性和功能是否优于经典方案培养的CIK细胞,为免疫细胞临床应用的细胞培养体系优化提供实验依据.方法 无菌条
【机 构】
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郑州大学第一附属医院生物细胞治疗中心,河南郑州,450052 郑州大学第一附属医院生物细胞治疗中心
【出 处】
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肿瘤药学基础研究与临床应用国际论坛
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目的 兔抗人胸腺免疫球蛋白(Rabbit Anti-human Thymocyte Globulin,ATG)是经批准上市用于预防移植器官排异的临床治疗药物,本研究探讨ATG替代-CD3单抗培养细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK),并检测其活性和功能是否优于经典方案培养的CIK细胞,为免疫细胞临床应用的细胞培养体系优化提供实验依据.方法 无菌条件下采集9例肿瘤患者外周血10ml,密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),分为4组,即CD3组与三种不同浓度的ATG组.每组在第0d均加入干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ),第1d分别加入α-CD3单抗(25ng/ml)或低(50ng/ml)、中(250ng/ml)、高剂量(500ng/ml)的ATG,每2-3天饲以重组人白介素Ⅱ(Recombinand human interleukin-Ⅱ,IL-Ⅱ)诱导培养,第13d收获CIK细胞.采用流式细胞术检测各组CIK细胞激活型表面标志物(CD28、CD27、CD69、NKG2D)、抑制型表面标志物(PD-1、CD152)和杀伤功能相关的标志物(CD107a)的表达.结果 与CD3单抗组相比,CD8+CD69+细胞的比例在低、中、高浓度ATG组均升高,差异显著具有统计学意义(F=3.411,P=0.0283)； CD8+NKG2D+的细胞比率在低、中、高ATG组有升高的趋势,但与CD3单抗组相比差异无统计学意义(P=0.2179)；其它表面标志物的表达在ATG组与CD3组均无差异(P＞0.05).结论 采用ATG刺激培养的CIK细胞活性优于经典方案培养的CIK细胞,抗肿瘤能力无差异,但ATG作为上市的临床治疗药物,较α-CD3单抗应用于临床级别的CIK细胞培养更安全可靠,且较α-CD3单抗价格低廉,可作为其替代品用于CIK细胞的培养.
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