【摘 要】
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将大黄鱼幼鱼进行体表消毒后,取其肝、肌肉和脑组织切成≤1mm3的组织块接种至25cm2培养瓶,启动原代培养.当三种组织细胞贴壁总面积占70%至80%培养瓶底面积时,消化传代启动传代
【机 构】
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集美大学水产学院,福建 厦门 361021
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将大黄鱼幼鱼进行体表消毒后,取其肝、肌肉和脑组织切成≤1mm3的组织块接种至25cm2培养瓶,启动原代培养.当三种组织细胞贴壁总面积占70%至80%培养瓶底面积时,消化传代启动传代培养.最终获得大黄鱼脑、肌肉以及肝组织的可连续传代细胞系.对这三种细胞系进行生长曲线测定显示其群体倍增时间均小于24小时.进一步通过MTT法评估三种不同生长因子(碱性成纤维生长因子bFGF、表皮生长因子EGF、肝细胞生长因子HGF)对上述细胞系增殖的影响.经统计学分析显示:三种生长因子均对细胞增殖呈现极显著剂量效应(p<0.01),在低浓度条件下(1 μ g/L)有明显促增殖作用,但是在高浓度条件下(i00 μg/L)对细胞增殖作用不明显,这与其他鱼类离体细胞培养的报道相一致.
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