【摘 要】
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[目的]探讨凡纳滨对虾血蓝蛋白在糖基化修饰水平的多态性及其免疫学意义。[方法]采用亲和层析及凝集素印记技术分离、鉴定得到LHt,LH73等糖基化程度不同的血蓝蛋白,并用
【机 构】
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汕头大学理学院生物学系,广东省海洋生物技术重点实验室,广东 汕头 515063
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[目的]探讨凡纳滨对虾血蓝蛋白在糖基化修饰水平的多态性及其免疫学意义。[方法]采用亲和层析及凝集素印记技术分离、鉴定得到LHt,LH73等糖基化程度不同的血蓝蛋白,并用凝集等实验分析其免疫学功能的差异,进而采用糖基氧化、病原菌刺激的方法探索糖基修饰对其免疫学功能的影响,最后结合质谱鉴定技术探索血蓝蛋白的抑菌作用靶标。[结果]亲和层析获得糖含量且免疫学活性不同的血蓝蛋白,当其糖链被氧化后免疫学活性都受到显著影响；副溶血弧菌(Vibro parahaemolyticus, VP)刺激后对虾血清中LHt、LH73表达均上调,LH73上调明显高于LHt,且LH73抑菌活性显著高于LHt,提示血蓝蛋白抑菌活性与其糖基化修饰有关；亲和孵育结合质谱鉴定得到VP外膜蛋白0mpC应为血蓝蛋白LH73抑菌作用靶标之一。[结论]研究首次发现凡纳滨对虾血蓝蛋白在糖基修饰水平存在多态性,且该多态性与血蓝蛋白发挥不同免疫学活性密切相关。
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