【摘 要】
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谷氏菌素(gougerotin)是由禾栗链霉菌产生的一种核苷肽类抗生素,具有抗革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、支原体及抗病毒等活性.谷氏菌素是由胞嘧啶、尿苷二磷酸葡糖醛酸、丝氨酸
【机 构】
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中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室,北京100101
【出 处】
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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会
论文部分内容阅读
谷氏菌素(gougerotin)是由禾栗链霉菌产生的一种核苷肽类抗生素,具有抗革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、支原体及抗病毒等活性.谷氏菌素是由胞嘧啶、尿苷二磷酸葡糖醛酸、丝氨酸和甘氨酸等小分子前体,经过一系列的酶促反应合成的.本研究旨在通过增加谷氏菌素生物合成基因簇的拷贝数,获得谷氏菌素的高产菌株,并在此基础上添加前体分子,进一步提高禾粟链霉菌中谷氏菌素的产量.利用-red介导的PCR-targeting技术在整合型质粒pSET152Erm上构建了尼可霉素生物合成基因簇，将其导入禾粟链霉菌中，获得在染色体上基因簇倍增的菌株Sgr-Gou。与野生型相比，Sgr-Gou的谷氏菌素产量提高了30％。同时，将基因簇中关键结构基因的启动替换为组成型强启动子，导入禾粟链霉菌中获得重组菌株Sgr-GOUe。与野生型相比，Sgr-GOUe的谷氏菌素产量提高了1.1倍。为了进一步提高谷氏菌素的产量，还研究了不同底物添加对产量的影响。结果表明，发酵培养液中添加三种前体底物(丝氨酸、胞嘧啶、甘氨酸)均能显著提高谷氏菌素的产量。通过增加抗生素生物合成基因簇的拷贝数，结合关键结构基因的启动子替换和前体添加，可以有效提高抗生素的产量，此研究结果为抗生素的开发应用提供了重要基础。
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