【摘 要】
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H5N1亚型禽流感病毒近年导致中国及东南亚地区的家禽和人感染、死亡,成为最重要的新发人畜共患传染病之一,疫苗免疫是控制本病的主要手段之一.本研究以对我国H5N1高致病力禽
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部动物流感重点开放实验室,国家禽流感参考实验室(哈尔滨)
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会
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H5N1亚型禽流感病毒近年导致中国及东南亚地区的家禽和人感染、死亡,成为最重要的新发人畜共患传染病之一,疫苗免疫是控制本病的主要手段之一.本研究以对我国H5N1高致病力禽流感病毒流行分离株抗原性具广泛针对性的GD/1/96株为两个表面基因HA和NA供体,通过定点突变和删除HA基因裂解位点与高致病力相关的碱性氨基酸,以流感病毒PR8为6个内部基因供体,利用反向基因操作技术手段,人工制造了一株高度抗原针对性、高度致弱、鸡胚生长适应良好的H5N1灭活疫苗种毒株Rel.Rel株不致死接种鸡胚,其鸡胚生长滴度(HA价)72小时可达11log2,比现有的野生型低致病性H5N2疫苗株生长滴度提高2~4倍,比高致病力H5N1亚型野生型分离株生长滴度提高8倍以上;该毒株对6周龄SPF感染试验静脉内接种致病指数(IVPI)为0,10<6.0>EID<,50>大剂量鼻腔内接种鸡不发病、不致死,呼吸道和泄殖腔不排毒;对6~8周龄BALB/c小鼠的半数致死量大于10<6.0>EID<,50>.结果证明Rel对鸡和哺乳动物无致病力.Rel株为种毒按常规方法制备的油乳剂灭活疫苗免疫SPF鸡后,一周内即可诱导出可检测的HI抗体,3周内平均HI抗体达到7log2以上,形成坚实的免疫保护,对我国不同时期分离H5N1高致病力禽流感病毒攻击不发病、不致死、不排毒.结果显示,Rel株用作H5亚型禽流感灭活疫苗种毒株,具有高度生物安全、鸡胚生长滴度高、抗原针对性强的突出优点,很适合作为种毒株用于大规模疫苗生产.
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