嗜酸乳杆菌16s rRNA PCR检测方法的建立

• 作 者: 颜世敢 朱丽萍 常维山 陆承平
• 机 构: 山东省农科院畜牧兽医研究所; 山东轻工业学院食品与生物工程学院; 山东农业大学动物科技学院; 南京农业大学动物医学院
• 发表日期: 2004年期
• 关键词: PCR 嗜酸乳杆菌 16s rRNA

根据嗜酸乳杆菌16s rRNA保守区的基因序列,自行设计合成1对特异性扩增509bp目的片段的引物,上游引物为5’CAT AGC CGA GTT GAG AGA TG 3’,下游引物为5’ATC TAA TCC TGTTCG CTA CCC A 3’。通过对PCR扩增条件的优化,建立了检测嗜酸乳杆菌的PCR方法。植物乳杆菌、保加利亚。乳杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均为阴性;嗜酸乳杆菌参考株则可扩增出509bp的特异性条带。扩增产物序列分析表明扩增片段的序列与GENEBANK发表的参考菌的核苷酸序列符合率为99%。用建立的PCR方法对分离的嗜酸乳杆菌进行检测,同样获得与嗜酸乳杆菌参考株一致的目的条带。实验结果表明,建立的PCR方法能够特异的检测嗜酸乳杆菌。