【摘 要】
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为建立H3N2亚型犬流感病毒(CIV)反向遗传操作系统,本研究利用RT-PCR技术扩增犬流感病毒A/canine/influenza virus/01/2010(H3N2)(简称C1)的八个目的基因片段,分别克隆至
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241
【出 处】
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上海市畜牧兽医学会2015年学术年会
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为建立H3N2亚型犬流感病毒(CIV)反向遗传操作系统,本研究利用RT-PCR技术扩增犬流感病毒A/canine/influenza virus/01/2010(H3N2)(简称C1)的八个目的基因片段,分别克隆至双向表达载体pBD上.8个重组质粒共转染293T细胞,48h后将细胞上清接种10日龄无特定病原(Specific pathogen free,SPF)鸡胚,成功拯救出具有血凝活性的病毒,其血凝效价为1∶128,与原始野生毒株的血凝效价一致;全基因组序列测定结果表明,拯救毒与亲本病毒的核苷酸序列完全一致,表明病毒拯救成功.禽源H3N2亚型犬流感病毒反向遗传操作系统的构建为进一步研究H3N2亚型犬流感病毒的致病机理及其跨物种传播分子机制等提供了技术平台.
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