【摘 要】
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牛干扰素α (Bovine interferon-α,BoIFN-α)原始基因在重组大肠杆菌中多以包涵体形式表达,为在大肠杆菌表达系统中获得可溶表达的具有活性的重组BoIFN-α,在不改变干扰
【机 构】
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上海市农业科学院,上海201106
【出 处】
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上海市畜牧兽医学会2015年学术年会
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牛干扰素α (Bovine interferon-α,BoIFN-α)原始基因在重组大肠杆菌中多以包涵体形式表达,为在大肠杆菌表达系统中获得可溶表达的具有活性的重组BoIFN-α,在不改变干扰素原有氨基酸组成的前提下,根据大肠杆菌密码子偏好性对BoIFN-α基因进行子优化.将优化后的BoIFN-α成熟蛋白基因分别克隆到表达载体pET-28a、PET30a和pCold Ⅱ载体中,在转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达.优化后的BoIFN-α基因在3种载体均获得可溶性表达,但以在载体pCold Ⅱ中获得的可溶性表达量最高.对重组菌rBoIFN-α-pCold Ⅱ/BL21的表达条件进行优化,在IPTG浓度为0.64mmol/L,诱导温度为15℃,诱导时间为9h的条件下,可溶性目的蛋白的表达量最高,达36mg/L菌液.重组BoIFN-α在MDBK细胞上抗水泡性口炎病毒的活性为1×106U/mg.
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