建立和验证人孕烷X受体(human pregnane X receptor,hPXR)拮抗剂体外筛选体系,并在转录水平和蛋白水平研究白藜芦醇通过拮抗hPXR对CYP3A4和MDR1 (P-gp)表达的影响.本研究用双荧光素酶报告基因系统检测共转染PXR表达质粒和CYP3A4报告质粒的LS174T细胞,在给予PXR配体利福平的同时分别给予不同浓度的白藜芦醇(RES),检测24 h后的荧光素酶活性；应
目的 中草药多以复方制剂用于临床,中草药-药物相互作用值得关注,代谢酶诱导是重要研究部分。本研究旨在与运用体外细胞模型来评价中药单体对CYP2B6的诱导作用并阐述诱导机理。方法 本实验运用报告基因质粒pGL3-CYP2B6-PB/XREM,核受体表达质粒pcDNA-hCAR3和pcDNA-hPXR,在HepG2细胞中运用双荧光素酶报告基因法初步筛选出通过PXR、CAR诱导CYP2B6的中药单体。对
目的 Y101属于苯丙氨酸二肽衍生物,是抗乙肝病毒治疗的创新性药物,目前正在进行开发研究.通过Caco-2细胞模型预测Y101口服吸收利用度,采用人类的MDR1基因稳定转染MDCK细胞建立的专一过度表达P-糖蛋白(P-gp)的细胞系筛选P-gp底物,研究Y101在Caco-2,MDCK-MDR1细胞模型中的吸收转运机制.方法 采用测定单层细胞的跨膜电阻值和跨膜转运试验验证细胞功能,LC-MS/MS
目的 探究蛋白磷酸化修饰对人尿苷二磷酸葡醛酸转移酶UGT1A3的影响。方法 将不同浓度的蛋白激酶抑制剂(姜黄素和钙感光蛋白C(calphostin C))分别与LS174T细胞或重组表达人UGT1A3的Sf9细胞共孵育1小时后，采用RT-PCR和westem blot分别测定LS174T细胞中UGT1A及Sf9细胞中人UGT1A3的表达变化，采用体外孵育黄酮类化合物的方法测定LS174T细胞中UG
目的 构建共转染CYP3A4和MDR1细胞模型.方法 先将P-gp的基因MDR1克隆到pcDNA3.1(+)(invitrogen)上,转染MDCK细胞(ATCC),经过G418筛选出单克隆细胞,得到MDCK-MDR1细胞株,然后将CYP3A4克隆到带有潮霉素B筛选标记的载体pcDNA3.1(+)/Hygro(invitrogen)上,转染MDCK-MDR1细胞,经过潮霉素B筛选,得到共转染CYP