【摘 要】
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目的：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)能够基于独特的质谱图纹来区别每一个细菌菌种,在普通细菌的快速鉴定中已被临床实验室应用.分枝杆菌由于独特的生长
【机 构】
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同济大学附属东方医院南院医学检验科 200120
【出 处】
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第三届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛
论文部分内容阅读
目的：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)能够基于独特的质谱图纹来区别每一个细菌菌种,在普通细菌的快速鉴定中已被临床实验室应用.分枝杆菌由于独特的生长特性和细胞成份,分离培养和菌株鉴定通常需要数周至数月.本研究旨在建立一种分枝杆菌全细胞蛋白试管提取方法,并评价MALDI-TOF-MS在非结核分枝杆菌快速菌种鉴定的应用价值.方法：①全细胞蛋白提取：以70％乙醇灭活菌体,0.1mm玻璃珠震击裂解细胞,甲酸和乙晴提取蛋白；②复苏128种非结核分枝杆菌ATCC标准菌株和57株临床分离株,提取蛋白于Bruker MicroflexTM质谱仪进行检测,MALDI Biotyper软件进行蛋白质特征指纹谱分析,建立标准菌株蛋白文库并进行临床分离株菌种鉴定.所有菌株均同时进行16SrDNA序列分析鉴定.结果：①MALDI-TOF-MS可在2.5小时内将90％的非结核分枝杆菌鉴定到种；②MALDI-TOF-MS鉴定非结核分枝杆菌ATCC标准菌株的准确率为92％,8％检出混合培养物,可能为保存过程的污染；③对临床菌株的鉴定：与16SrDNA序列分析比较,89.5％结果完全一致；16SrDNA序列不能鉴别到种的龟/脓肿分枝杆菌复合群、堪萨斯/胃分枝杆菌复合群、鸟/胞内分枝杆菌复合群用MALDI-TOF-MS可鉴定到种.结论：MALDI-TOF MS鉴定非结核分枝杆菌快速、准确、经济,可作为临床实验室非结核分枝杆菌菌种鉴定的一线选择方法.
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