【摘 要】
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本实验旨在研究长寿老人肠道双歧杆菌耐酸突变株BBMN68M与野生株基因及功能差异.通过酸胁迫筛选到一株BBMN68耐酸突变株BBMN68m,利用酸胁迫耐受性试验确定突变株耐酸性是稳定遗传；利用随机扩增的多态性DNA(RAPD)技术确定突变株与野生株基因组具有显著差异.全基因组测序结果显示耐酸突变株BBMN68m与野生株基因组相比较19个基因核苷酸序列发生改变,其中6个基因(分别为bbmn68 28
【机 构】
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中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京,100083
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本实验旨在研究长寿老人肠道双歧杆菌耐酸突变株BBMN68M与野生株基因及功能差异.通过酸胁迫筛选到一株BBMN68耐酸突变株BBMN68m,利用酸胁迫耐受性试验确定突变株耐酸性是稳定遗传；利用随机扩增的多态性DNA(RAPD)技术确定突变株与野生株基因组具有显著差异.全基因组测序结果显示耐酸突变株BBMN68m与野生株基因组相比较19个基因核苷酸序列发生改变,其中6个基因(分别为bbmn68 286、bbmn68_375、bbmn68 825、bbmn68 1012、bbmn68 1211、bbmn68_1462)编码的氨基酸序列发生改变,3个基因(bbmn68 286、bbmn68 375、bbmn68_1211)编码蛋白功能域内发生氨基酸位置改变.Bbmn68_1012 (galactosyl transferase cpsD)是合成双歧杆菌胞外多糖的关键基因,该基因2个核苷酸序列发生突变,预测蛋白的pl由8.94变为9.19.突变株BBMN68m胞外多糖的产量较野生株降低50％.扫描电镜和透射电镜结果显示,突变株表面较光滑,胞外多糖量较低.在酸胁迫条件下野生株的bbmn68 1012表达量显著下调,而突变株该基因表达量没有显著变化.本研究结果显示,双歧杆菌胞外多糖合成关键基因bbmn68 1012与菌株酸耐受密切相关.
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