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目的:根据聚合酶链反应(PCR)的基本原理和单核苷酸多态性(SNP)具体特点,设计并探讨四引物扩增受阻突变体系聚合酶链反应和特定引物扩增PCR合并限制性内切酶酶切鉴定方法在SNP基因分型中的应用。 方法:利用人核酸外切酶1(hEX01)基因第十、十三外显子C49T和C59T单核苷酸多态性为研究对象,以四引物扩增受阻突变体系聚合酶链反应的原理设计四种引物进行扩增,从而对Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶用量及内外引物浓度比例4个因素进行优化。同时针对单核苷酸多态位点的碱基序列设计特定的引物扩增,引入限制性酶切位点,通过酶切后电泳图结果判定SNP类型。