【摘 要】
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目的：构建AP-2 βsiRNA干扰载体，瞬时转染SW620细胞，以实现siRNA表达载体对SW620细胞AP-2 β基因的抑制；检测AP-2 β干扰载体转染后hTERT表达水平的变化，以期进一步探讨AP-2
【机 构】
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山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,太原 030001
【出 处】
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泛环渤海地区(七省二市)生物化学与分子生物学会2010年学术交流会
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目的：构建AP-2 βsiRNA干扰载体，瞬时转染SW620细胞，以实现siRNA表达载体对SW620细胞AP-2 β基因的抑制；检测AP-2 β干扰载体转染后hTERT表达水平的变化，以期进一步探讨AP-2 β基因在肿瘤发生过程中的分子机制并寻找肿瘤基因治疗的新靶点。方法：应用RT-PCR和Western Blot Analysis检测转录因子AP-2 β在大肠癌细胞中的表达水平；构建靶向抑制AP-2β基因的siRNA的真核表达载体；通过脂质体介导转染大肠癌细胞，镜下观察转染效率和细胞形态的变化；应用实时荧光定量PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测siRNA表达载体对AP-2 β基因的抑制情况；应用RT-PCR检测AP-2 β干扰载体转染后hTERT表达水平的变化；流式细胞术分析AP-2 β干扰载体转染后大肠癌细胞的凋亡变化。
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